合作单位
我们的客户群体与合作单位:
国内YL机构:北京大学医院、北京协和医院、上海市中医医院、上海儿童医院、南京军区总院、江苏省中医院、北京仁济医院、济南儿童医院、河北医科大学第二医院、复旦大学医学院儿科医院、第二军医大学肝胆外科医院及长海医院等
国内科研院校:北京大学、复旦大学 、上海第二医科大学、华中科技大学、 中南大学、ZG医科大学、天津医科大学、南京中医药大学、南京医科大学、ZG药科大学、南京农业大学、河北医科大学、哈尔滨医科大学、重庆医科大学、安徽医科大学、东南大学、广西医科大学、新疆医科大学、昆明医学院、 广东医学院等
使用方法
操作问题解析
1. 问:ELISA方法的准确性一般会用LC、LC-MS或者LC-MSMS做验证,因为我的方法涉及到小分子药物的衍生测定,所以液相的方法达不到回收率,请问有没有其他的方法可以用来验证ELISA方法的准确性呢?有没有这种可能是我的药物衍生体系本身这种方法与液相的流动相冲突,不适合用液相去测定?
答:通常用ELISA方法检验出来的阳性样品,需要用LC、LC-MS、GC-MS或者LC-MSMS做确证,因为ELISA方法的存在约5%左右的假阳性。究竟用上述的哪一种方法去确证其准确性,是要根据被测组分的理化性质决定的,例如组分在300度也不能够汽化,肯定不能用GC-MS;组分结构中有共轭,存在 n→π跃迁,π→π跃迁,一般会用HPLC紫外检测器;若组分具有荧光或者通过衍生化反应可以定量产生具有荧光的物质,则会用HPLC荧光检测器。以此类推,究竟用什么方法确证取决于被测组分的理化性质,而不是凭空想象。
2. 问:做了很多次ELISA实验,每次都能够得到线性比较好的标准曲线,但是同样浓度的标准品每次的OD值都不一致,猜可能是酶标板的问题,有什么方法可以快速验证酶标板的可靠性吗?
答:ELISA本身灵敏性很高,每次做出来的值不一样很正常,特别是od值比较大的时候更是差别很大,但是只要不要偏差太大就好,一般偏差要求10%内吧,好的数据是3%内。
首先要稳定所有的条件,不同的条件下做的板子读值不一样很正常。在同样条件下同批次的板子,如果测定不一样,就是包被问题或者保护剂的问题,但这两个都是各个试剂盒的机密,Z好看看文献里别人怎么做的。
其次每次实验的标曲上同一浓度样品的OD值不一样是很正常的,这与抗原抗体反应体系、作用时间、显色时间等等一系列的因素有关。鉴定该ELISA体系是否可靠,Z关键的指标是加标回收率和稀释线性,如果你怀疑的话可以做一下。
一般来说,国外知名厂商的ELISA试剂盒是没有问题的。同时你还要看一下说明书中ELISA试剂盒的灵敏度,如果样品浓度低于该检测下限,则无法检测到,这是很正常的现象,并不是非要每个样品都要测出值才可以。
安装指南
实验前的准备
1.要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
2.实验时,要使底物避光保存。
3.用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
4.吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
5.要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但Z好有专业人员进行矫正。
6.要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
满足标准
劲马生物重磅出击
截止2015年2月底,引用上海劲马生物ELISA试剂盒的SCI文章总数突破1030篇,并且还在以15篇/月的速度递增,有的更是发表在, ,,, 等国际期刊上。 部分代表性SCI文献
■ Tianlong Liu, Linlin Li, Changhui Fu, Huiyu Liu, Dong Chen, Fangqiong Tang. Pathological mechanisms of liver injury caused by
continuous intraperitoneal injection of silica nanoparticles. Biomaterials 2012; Pages 2399–2407. (IF: 8.312)
引用产品:Mouse TNF-α and IL-1β ELISA KIT
作者单位:ZG科学院理化技术研究所纳米材料可控制备与应用研究室
■ Rui Wanga, Zhenheng Wang, Junfeng Zhan, etc. Particle-induced osteolysis mediated by endoplasmic reticulum stress in prosthesis
loosening. Biomaterials 2013, Volume 34, Issue 11, Pages 2611–2623. (IF: 8.312)
引用产品:Mouse IL-6, TNF-α and IL-1β ELISA KIT
作者单位: 南京大学生命科学院医药生物技术国家ZD实验室
■ H Zhang, X Chu, Y Huang, G Li, Y Wang, Y Li, C Sun. Maternal vitamin D deficiency during pregnancy results in insulin resistance in
rat offspring, which is associated with inflammation and Iκ bα methylation. Diabetologia 2014, Volume 57, Issue 10, pp 2165-2172. (IF:
6.88)
引用产品:Rat IL-1β, IL-6, IL-8, TNF-α ELISA KIT
作者单位: 哈尔滨医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室