IgE进口价,大鼠免疫球蛋白酶联免疫（ELISA）试剂盒厂家_详细资料

产品信息

大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒的使用目的：本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中产品含量。其它相关说明书请咨询我司在线人员或业务人员！

参数规格
产品详细信息
中文名称：大鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa试剂盒
产品规格：48T/96T
产品价格：询价
检测范围：详见elisa试剂盒说明书
elisa试剂盒敏感性
在测定血清中某一物质的含量时，化学比色法的敏感度为mg/ml水平，酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml，免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。标记的免疫测定的敏感度可提高数千倍，达ng/ml水平。例如，用放射免疫测定法或酶免疫测定法测定HBsAg，其敏感度可达0.1ng/ml。
注意事项
大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒【http://www.tsz168.com/产品查询网址】注意：
1. 不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同，务必按照所用试剂盒严格操作，否则容易产生检测结果的不确定性.
2. 若不同批号试剂的不同组分(A液或酶工作液)，或不同试剂的不同组分进行交叉使用，有可能出现显色浅或本底高，花板等情形。
3. 加样时样品量误差，对于阴或很阳的标本影响不大，但对阈值附近的标本影响极大，建议校对加样器。
4. 反应时间的误差，做大量标本时，孔和一孔以及一些特殊标本可能影响较大。
5. 由于滴瓶的精密性肯定不如加样器，不排除不同滴头滴量的误差。另外滴加过程中是否产生气泡、速度是否均匀，是否颤动等影响液量的因素均可导致以上情况。高标准要求时应使用加样器。
6. 阈值附近实际上是个灰区(gray scale)，不能截然分为阴性、阳性，国外厂家均要求对这部分可疑标本进行奇数次复检，以次数多者为准，如一次阳两次阴判为阴，但实际上是否为阴不好说，只有判为可疑，临床上可以让患者过一段时间后再测。
7. 肉眼观察稍显色，酶标仪打印为阴性的标本在实际工作中是难以避免的，肉眼目测结果不可靠，应以酶标仪判读为准。
8. 由阴性变为强阳性原因多为操作过程中漏加试剂等有关。
9. 临界值附近标本波动为正常现象，任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。
安装指南
大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒【http://www.tsz168.com/产品查询网址】数据处理及结果报告
1 计算回收率：回收率1 =
2 计算平均回收率：平均回收率 =
3 计算比例系统误差：比例系统误差 = - 平均回收率
4 可接受判断：比例系统误差不大于CLIA 88允许总误差的1/2。
标本要求
常见样本的处理方法：
1. 血清样本的处理方法
对于血清样本的处理，都是离心取上清液待检，在做预实验过程中，血清样本稀释5倍直接进行实验。
2. 牛奶样本的处理方法
方法一：取10ml牛奶放入离心管，加入10ml乙酸乙酯，超声震荡30min，然后4000g离心10min(如两相之间出现乳化层，则将样品瓶放在80℃的水浴中约5min，再离心)移取1ml乙酸乙酯层至另外试管中，60℃氮气流下蒸干，残留物用缓冲液2ml缓冲后备用，前处理过程约需2小时。
方法二：取10ml牛奶10℃3500G离心10MIN，祛除上层脂肪，取5ml脱脂奶粉加入150微升17.2%亚铁，出现沉淀，漩涡混合，然后加入150微升53.5%硫酸锌。再次漩涡混合。15摄氏度3500g离心10分钟，取上层清液用缓冲液1：2稀释待用，前处理过程所需1小时。
3. 粪便样本的处理方法
对于粪便样本的处理，一般要求采集干的粪便，稀的粪便不利于检测(对样本处理带来难度，也会使准确性降低)。
粪便样本处理如下：
① 收集：直接用医院临床收集粪便的耗材进行收集；
② 采样：一般选取的重量不能低于50mg，以1g为基准。称取1g加9ml的PBS(磷酸盐缓冲液，PH控制在7.2-7.4，浓度为0.01mol/L)换算成匀浆的比例就是10%；
③ 保存：匀浆后的样本如果采样周期在1周之内，可以保存在2-8℃，如果取样周期在一个礼拜以上一个月以内，-20℃保存。如果取样周期超过1个月，保存在-80冰箱！低温保存的话，尽量避免反复冻融。
4. 植物组织样本的处理方法
植物组织的提取，不管是根茎组织还是叶片组织还是果实组织，都应该采用鲜重的计重方式，一般要遵循以下原则：
① 称取的组织重量不能低于50mg。
② 匀浆的比例按照10%，即1g组织加9ml的匀浆液，匀浆液一般选取PBS(PH=7.2-7.4)
③ 组织在匀浆器匀浆过程中，匀浆液应该分2次加进去，这样匀浆更充分。
④ 充分匀浆完成后离心取上清，离心机的转数选取2000-3000转每分，转数不宜超过5000.离心时间为15-30分钟。

试剂的准备之洗涤
洗涤在 ELISA 过程中虽不是一个反应步骤，但却也决定着实验的成败。ELSIA 就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而
在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA 操作中，洗涤是Z主要的关键技术，应引起操作者的高度重视，操作者应严格按要求洗涤，不得马虎。
洗涤的方式除某些 ELISA 仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种，过程如下：
(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液；b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后，即甩去)；c.浸泡，即将洗涤液注满板孔，放置1-2 分钟，间歇摇动，浸泡时间不可随意缩短；d.吸干孔内液体。吸干应彻底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干；e.重复操作c 和d，洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高，可增加洗涤次数或延长浸泡时间。微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，从而削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质回复到水溶液状态，从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温 20，其浓度可在0.05%-0.2%
之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
(2)流水冲洗式流水冲洗法Z初用于小珠载体的洗涤，洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲洗 2 分钟后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2 分钟，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲洗式则好比淋浴，其洗涤效果更为彻底，且也简便、快速。
已有实验表明，流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔表面，洗涤效果更佳。
产品资料
试剂盒组成 6. 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个我们的客户群体与合作单位：国内YL机构：北京大学医院、北京协和医院、上海市中医医院、上海儿童医院、南京军区总院、江苏省中医院、北京仁济医院、济南儿童医院、河北医科大学第二医院、复旦大学医学院儿科医院、第二军医大学肝胆外科医院及长海医院等国内科研院校：北京大学、复旦大学、上海第二医科大学、华中科技大学、中南大学、ZG医科大学、天津医科大学、南京中医药大学、南京医科大学、ZG药科大学、南京农业大学、河北医科大学、哈尔滨医科大学、重庆医科大学、安徽医科大学、东南大学、广西医科大学、新疆医科大学、昆明医学院、广东医学院等
满足标准
酶联免疫试剂盒操作的通用的规则
1. 要确保微量加样器的准确性，可以使用蒸馏水和电子天平进行确定(由于蒸馏水不含杂质，温度环境为20%左右时，lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加样器都应该将其量程和量程进行确定。
2. 在使用微量加样器时，吸取不同瓶子中液体后要更换枪头，即使吸取标准品溶液。
3. 吸取液体时速度不易太快，以免产生气泡，吸取的量不够准确。
4. 将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孑L壁接触，液滴会自然流下去。吸入液体时的Z好的方法是吸两档打一档，防止由于枪头的毛细作用
使得部分液体不能流出而造成的误差。
5. 吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸，减少误差。
6. 液体全部加入酶标孔后，Z好将酶标板放在桌子上平行轻轻摇晃30s，使液体充分混合均匀，也使其得到充分的反应。
7. 孵育时要使盖板膜封好酶标板，防止水分蒸发，以防曲线不成线性。
8. 实验前30min将试剂盒中的所有试剂从冰箱取出，使试剂盒中的所有试剂与提取好的样品溶液的温度相同，酶标板只要取出所需量。
9. 由于底物显色剂对光及其敏感，因此要避光保存。
10. 手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15～30s，不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中，防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
11. 检测吸光度前应将酶标仪打开，将其预热30min以上。
12. 底物为TMB，避免与皮肤相接触。终止液为2tool的浓硫酸具有腐蚀性，应尽量避免接触皮肤。
13. 孵育的时间应该严格按照试剂盒说明书上的时间为准。
14. 要尽量做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。
15. 对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
16. 没有去离子水或双蒸水时，可以使用娃哈哈纯净水配制溶液，切勿使用自来水。
安装指南
试剂的准备
1. 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。
稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：
400 pg/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul
200 pg/ml (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
100 pg/ml (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
50 pg/ml (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
25 pg/ml (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
12.5 pg/ml (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 pg/ml (空白对照) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。
酶标仪判读结果
◎显色反应终止后应立刻比色(30 分钟内)。
常见的显色系统有OPD 和TMB 二种，以后者Z为常见，而TMB 酸不易终止因此必须尽快比色以免影响结果。OPD 终止后显棕色，测定波长为 490nm；TMB 终止后显黄色，测定波长为450nm，二种底物的校正波长均用6 30nm。
使用双波长的优点可以消除反应板条上的划痕手印的干扰。同时要注意反应板应用纸吸干后才能置酶标仪中比色，否则吸光度易出现负值或损坏滤光片。

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