大鼠淋巴细胞因子酶联免疫（ELISA）试剂盒_详细资料

产品信息

大鼠淋巴细胞因子ELISA试剂盒全程技术指导。(包括售前的标本收集，使用过程中不明白的地方，实验结束后的数据分析，有任何疑问，我们技术都会即时给你去电).

参数规格
产品详细信息
中文名称：大鼠淋巴细胞因子elisa试剂盒
产品规格：48T/96T
产品价格：询价
检测范围：详见Elisa试剂盒说明书
Elisa试剂盒敏感性
在测定血清中某一物质的含量时，化学比色法的敏感度为mg/ml水平，酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml，免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。标记的免疫测定的敏感度可提高数千倍，达ng/ml水平。例如，用放射免疫测定法或酶免疫测定法测定HBsAg，其敏感度可达0.1ng/ml。
注意事项
大鼠淋巴细胞因子ELISA试剂盒【http://www.tsz168.com/产品查询网址】注意事项：
1 加入体积：加入的标准液体积一般在样本体积的10%以内；并且保证在加样过程中的取样准确度。
2 加入待测物的浓度：在保证总浓度在方法分析测量范围内，尽量使加入标准液后样本中的被测物浓度达到医学决定水平。
3 标准物浓度：因为标准物溶液加入体积不到10%，为保证得到不同浓度的回收样本，标准物的浓度应该足够高。
公司实验室仪器设备清单：
酶标仪：芬兰（Labsystems Multiskan MS）
仪器型号：352型
洗板机：芬兰（Thermo Labsystems）
仪器型号：AC8
离心机：微量高速离心机（国产）
仪器型号：TG16W
培养箱：隔水式恒温培养箱（国产）
仪器型号：GNP-9080型
电镜仪器：美国FEI公司台式扫描电镜Phenom
仪器型号：TY-HRC
实时定量PCR (RT-PCR): 罗氏
仪器型号：Lightcycler 480
免疫荧光：Modulus
安装指南
大鼠淋巴细胞因子ELISA试剂盒【http://www.tsz168.com/产品查询网址】数据处理及结果报告
1 计算回收率：回收率1 =
2 计算平均回收率：平均回收率 =
3 计算比例系统误差：比例系统误差 = - 平均回收率
4 可接受判断：比例系统误差不大于CLIA 88允许总误差的1/2。

ELISA 原理
●根据检测目的和操作步骤不同有三种基本方法。
●双抗体(原)夹心法检测抗原(体)的常见方法，应用针对抗原两个不同决定族的两种单抗分别作为固相载体和酶标抗体检测溶液中的抗原(适用于二价以上抗原,不能测小分子半抗原)。
●间接法检测抗体的方法，利用酶标记的抗抗体(第二抗体)检测已与固相抗原结合的抗体。
●竞争法检测抗原或小分子半抗原、抗体，以测抗原为例，使待测抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合，结果如待测抗原含量越多，与固相抗体结合的酶标抗原就越少，显色越浅，二者呈负相关。
ELISA 原理
今后的发展方向
●聚苯乙烯表面的高级制备。已有的技术是酰肼化(聚二氟乙叉，PVDF)；生物素化；预包被多聚赖氨酸等，均是专利产品。
●酶促信号放大的改变，如酶促荧光、酶促化学发光等。
使用方法
试剂的准备
ELISA临床质量评价与质量管理
ELISA 试剂的评价(evaluation)分两个方面：一是试剂本身的质量评价，符合一定要求后才能生产供应；一是在临床应用中效果的评价。以肝炎ELISA 诊断试剂为例，首先必须通过ZG药品生物制品检定，以得到生产的许可。检定内容除包装、标签、说明书等外，对试剂的性能，如特异性、灵敏度、精密度和线性等均需逐项检定，通过对一系列参比品的检测，结果符合要求者才为合格。ELISA 试剂的临床质量评价是用该试剂对临床样本进行检测，以观察其实际应用价值。部临检ZX对乙肝ELISA 诊断试剂在这方面进行了工作，通过质量评价，促进了试剂质量的提高。
1 诊断试剂临床质量评价要点
从临床应用角度考核检验试剂的可靠性，是以其能否区分健康与疾病的能力作为依据的。目前还很难找到可靠的试验，任何试验都会出现假阳性或假阴性。判断试验的可靠性常以其灵敏度及特异性作为考核标准。临床应用的灵敏度用疾病患者试验阳性的百分率表示，特异性以无病者试验阴性的百分率表示。
进行这种评价，首先需要收集有关的病人血清，然后用公认的检测该项标志物Z可靠的试剂进行测定，以确定其为阳性或阴性。
这一组表明测定物为阳性或阴性的血清组成"血清盘"(panel)。被评价的试剂测定此血清所得结果与血清盘标明的结果的关系如下表：
血清盘结果
＋－
合计
受检试剂结果＋ a b a+b
－ c d c+d
合计 a+c b+d A+b+c+d
表中a 为真阳性，b 为假阳性，c 为假阴性，d 为真阴性。
被评价试剂的各项性能指标按以下分式计算：
灵敏度(%)=a/(a+c)×
特异性(%)=b/(b+d)×
符合率(%)=(a+d)/(a+b+c+d) ×
一般认为灵敏度或特异性>90%为良好。符合率是综合灵敏度和特异性的指标。
2 临床考核血清盘的制备要求
1、采用人的原血清；
2、血清盘应具有相应的稳定性；
3、血清盘中样本不含防腐剂，或只含极微量的、不影响检验结果的防腐剂；
4、血清盘所包含的阴性样本和阳性样本约各占一半；
5、阳性样本中，应有一定数量的强阳性和弱阳性样本；
6、血清盘中应有一定数量的临界值上、下含量的样品，以检验试剂的灵敏度。
7、血清盘中应包含与该项检验相关的病种样本和已积知具有干扰物质(RF 因子)的样本，
以检验试剂的特异性。
满足标准
抗原抗体反应
可逆性
抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡，其反应式为：Ag+Ab→Ag·Ab
抗体的亲和力(affinity)是抗原抗体间的固有结合力，可以用平衡常数K 表示：K=[Ag·Ab]／[Ag][Ab]
Ag·Ab 的解离程度与K 值有关。高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合，两者结合牢固，不易解离。解离后的抗原或抗体均能保持原有的结构和活性，因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗体。在抗血清中，特异性的IgG 抗体仅占总IgG 中的极小部分。用亲和层析法提取的特异性抗体，
称为亲和层析纯抗体，应用于免疫测定中可得到更好的效果。
Z适比例
在恒定量的抗体中加入递增量的抗原形成抗体复合物(沉淀)的量见图1-4。曲线的高峰部分是抗原抗体比例Z合适的范围，称为等价带(zone of equivalence)。在等价带前后分别为抗体过剩带和抗原过剩带。如果抗原或抗体极度过剩，则无沉淀物形成，在免疫测定中称为带现象(zone phenomenon)。抗体过量称为前带(prezone)，抗原地过量称为后带(postzone)。在用免疫学方法测定抗原时，应使反应系统中有足够的抗体量，否则测得的量会小于实际含量，甚至出现假阴性。
特异性
抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系，所以抗原抗体反应具有高度的特异性。例如乙肝病毒中的表面抗原( HBsAg)、e 抗原(HBeAg)和核心抗体(HBcAg)，随来源于同一病毒，但仅与其相应的抗体结合，而不与另外两种抗体反应。抗原抗体反应的这种特异性使免疫测定能在一非常复杂的蛋白质化合物(例如血清)中测定某一特定的物质，而不需先分离待检物。
但是这种特异性也不是的。假使两种化合物有着部分相同的结构，在抗原抗体反应中可出现交叉反应。例如：绒毛膜促性腺激素( hCG)和黄体生成激素(LH)均由α和β两个亚单位组成，其结构的不同处在β亚单位，而两者的α亚单位是同类的。用hCG 免疫动物所得的抗血清中含有抗α-hCG 和抗β-hCG两种抗体，抗α-hCG 抗体将与LH 中的α酶位发生交叉反应。在临床检验中，如用抗hCG 抗血清作为妊娠诊断试剂检定尿液中hCG，只能用于hCG浓度较高的试验，否则妇女生理性排泄入尿液中的微量 LH 将与之发生交叉反应。
敏感性
在测定血清中某一物质的含量时，化学比色法的敏感度为 mg/ml 水平，酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml，免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。标记的免疫测定的敏感度可提高数千倍，达ng/ml 水平。例如，用放射免疫测定法或酶免疫测定法测定HBsAg，其敏感度可达0.1ng /ml。
免疫测定在临床检验中的应用
由于各种抗原成份，包括小分子的半抗原，均可用以制备特异性的抗血清或单克隆抗体，利用此抗体作为试剂就可检测标本中相应的抗原，因此免疫测定的应用范围极广，在临床检验中可用于测定：
1) 体液中的各种蛋白质，包括含量极少的蛋白质如甲胎蛋白等。
2) 激素，包括小分子量的甾体激素等。
3) 抗生素和药物。
4) 病原体抗原，HBsAg、HBeAg 等。
5) 另外，也可利用纯化的抗原检测标本中的抗体，例如抗-HBs 等。
标记的免疫测定
如上所述，免疫测定是一种很敏感的测定方法，抗原抗体反应后直接测定形成的沉淀或浊度，敏感度可达 5~10μg/ml，但在临床检验中，某些待测物在标本中的含量远低于这一水平，因此要寻找增加敏感度的方法。标记的免疫测定是将检测试剂中的抗原或抗体用可微量测定的物质加以标记，通过测定标记物来提高敏感度。在放射免疫测定和酶免疫测定中，标记物分别为放射性核素和酶，用测定放射性和酶活力来计算待检物的量，敏感度可比直接测定沉淀物提高数百至数千倍。在标记免疫测定中，一般加入过量的标记试剂以保证与待测物彻底反应。以标记抗体(Ab ※)检测抗原(Ag)为例，反应式如下：Ag+ Ab※ → AgAb※+ Ab※在反应产物中有与 Ag 结合的Ab※和游离和Ab※ ，如不将两者分离而测定标记物，测得的结果将为两者之和。因此，游离标记物与结合标记物的分离是标记免疫测定中的重要步骤。可采用多种手段，固相载体是其中之一。如将抗原或抗体包被在固相载体上，然后再与标记的抗原或抗体直接反应，结合的标记物被固定在载体上，而游离的标记物留于溶液中。这样可以通过洗涤将游离的 Ab ※除去，结合标记物的测定可在固相上进行。
满足标准
劲马生物重磅出击
截止2015年2月底，引用上海劲马生物ELISA试剂盒的SCI文章总数突破1030篇，并且还在以15篇/月的速度递增，有的更是发表在, ,,, 等国际期刊上。
部分代表性SCI文献
■ Tianlong Liu, Linlin Li, Changhui Fu, Huiyu Liu, Dong Chen, Fangqiong Tang. Pathological mechanisms of liver injury caused by
continuous intraperitoneal injection of silica nanoparticles. Biomaterials 2012; Pages 2399–2407. (IF: 8.312)
引用产品：Mouse TNF-α ａnd IL-1β ELISA KIT
作者单位：ZG科学院理化技术研究所纳米材料可控制备与应用研究室
■ Rui Wanga, Zhenheng Wang, Junfeng Zhan, etc. Particle-induced osteolysis mediated by endoplasmic reticulum stress in prosthesis
loosening. Biomaterials 2013, Volume 34, Issue 11, Pages 2611–2623. (IF: 8.312)
引用产品：Mouse IL-6, TNF-α ａnd IL-1β ELISA KIT
作者单位: 南京大学生命科学院医药生物技术国家ZD实验室
■ H Zhang, X Chu, Y Huang, G Li, Y Wang, Y Li, C Sun. Maternal vitamin D deficiency during pregnancy results in insulin resistance in
rat offspring, which is associated with inflammation ａnd Iκ bα methylation. Diabetologia 2014, Volume 57, Issue 10, pp 2165-2172. (IF:
6.88)
引用产品：Rat IL-1β, IL-6, IL-8, TNF-α ELISA KIT
作者单位: 哈尔滨医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室
合作单位
我们的客户群体与合作单位：
国内YL机构：北京大学医院、北京协和医院、上海市中医医院、上海儿童医院、南京军区总院、江苏省中医院、北京仁济医院、济南儿童医院、河北医科大学第二医院、复旦大学医学院儿科医院、第二军医大学肝胆外科医院及长海医院等
国内科研院校：北京大学、复旦大学、上海第二医科大学、华中科技大学、中南大学、ZG医科大学、天津医科大学、南京中医药大学、南京医科大学、ZG药科大学、南京农业大学、河北医科大学、哈尔滨医科大学、重庆医科大学、安徽医科大学、东南大学、广西医科大学、新疆医科大学、昆明医学院、广东医学院等

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