大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA试剂盒专业提供,有96T/48T两种规格,包括96/48孔酶标包被板、酶标试剂、样品稀释液、显色剂AB液、标准品、浓缩洗涤液,封板膜,说明书等。
参数规格产品详细信息
中文名称:大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)elisa试剂盒
产品规格:48T/96T
产品价格:询价
检测范围:详见elisa试剂盒说明书
Elisa试剂盒敏感性
在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。标记的免疫测定的敏感度可提高数千倍,达ng/ml水平。例如,用放射免疫测定法或酶免疫测定法测定HBsAg,其敏感度可达0.1ng/ml。
注意事项
大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA试剂盒【http://www.tsz168.com/产品查询网址】注意事项:
1 加入体积:加入的标准液体积一般在样本体积的10%以内;并且保证在加样过程中的取样准确度。
2 加入待测物的浓度:在保证总浓度在方法分析测量范围内,尽量使加入标准液后样本中的被测物浓度达到医学决定水平。
3 标准物浓度:因为标准物溶液加入体积不到10%,为保证得到不同浓度的回收样本,标准物的浓度应该足够高。
公司实验室仪器设备清单:
酶 标 仪:芬兰(Labsystems Multiskan MS)
仪器型号:352型
洗 板 机:芬兰(Thermo Labsystems)
仪器型号:AC8
离 心 机:微量高速离心机(国产)
仪器型号:TG16W
培 养 箱:隔水式恒温培养箱(国产)
仪器型号:GNP-9080型
电镜仪器:美国FEI公司台式扫描电镜Phenom
仪器型号:TY-HRC
实时定量PCR (RT-PCR): 罗氏
仪器型号:Lightcycler 480
免疫荧光:Modulus
安装指南
大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA试剂盒【http://www.tsz168.com/产品查询网址】数据处理及结果报告
1 计算回收率:回收率1 =
2 计算平均回收率:平均回收率 =
3 计算比例系统误差:比例系统误差 = - 平均回收率
4 可接受判断:比例系统误差不大于CLIA 88允许总误差的1/2。
满足标准
劲马生物重磅出击
截止2015年2月底,引用上海劲马生物ELISA试剂盒的SCI文章总数突破1030篇,并且还在以15篇/月的速度递增,有的更是发表在, ,,, 等国际期刊上。 部分代表性SCI文献
■ Tianlong Liu, Linlin Li, Changhui Fu, Huiyu Liu, Dong Chen, Fangqiong Tang. Pathological mechanisms of liver injury caused by
continuous intraperitoneal injection of silica nanoparticles. Biomaterials 2012; Pages 2399–2407. (IF: 8.312)
引用产品:Mouse TNF-α and IL-1β ELISA KIT
作者单位:ZG科学院理化技术研究所纳米材料可控制备与应用研究室
■ Rui Wanga, Zhenheng Wang, Junfeng Zhan, etc. Particle-induced osteolysis mediated by endoplasmic reticulum stress in prosthesis
loosening. Biomaterials 2013, Volume 34, Issue 11, Pages 2611–2623. (IF: 8.312)
引用产品:Mouse IL-6, TNF-α and IL-1β ELISA KIT
作者单位: 南京大学生命科学院医药生物技术国家ZD实验室
■ H Zhang, X Chu, Y Huang, G Li, Y Wang, Y Li, C Sun. Maternal vitamin D deficiency during pregnancy results in insulin resistance in
rat offspring, which is associated with inflammation and Iκ bα methylation. Diabetologia 2014, Volume 57, Issue 10, pp 2165-2172. (IF:
6.88)
引用产品:Rat IL-1β, IL-6, IL-8, TNF-α ELISA KIT
作者单位: 哈尔滨医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室
实验室内质量控制程序
临床检验的检测结果,每次或每天之间不可能没有误差。决定允许的误差范围,以临床上不造成误诊与漏诊为准,通过以下步骤来确定质控范围。
1) 条件下的测定误差。
2) 已知值的血清在常规检验条件下的误差。
3) 未知值的血清在常规检验条件下的误差。
4) 临床应用的要求。对任何一个试验都应确定一个允许的误差范围,前题是满足临床要求。如允许误差定得过小,在临床上不存在任何意义,但为了符合该规定却要花费很大人力、物力和时间。相反,如果将允许误差定得过大,将使监测系统察觉不到临床上要求检出的误差, 失去质控的意义。
1 条件下已知值质控血清变异(optimal conditions variance,简称OCV)的测定
在本实验室条件下(包括操作者、试剂、仪器等)检测质控血清 20-30 次,测得结果计算,求出该组数据的均值和标准差(SD)表示该实验室的工作质量。
现举例说明 HBsAg ELISA 法检测时OCV 的测定。使用的质控制血清为临界血清,HBsAg 浓度为5ng/ml。在该实验室中选择素质Z好、操作Z熟练的技术员进行认真地专门测定,选用的试剂盒,检测之前,将恒箱、加样器等认真校正、调校正、调试,使用新的加样吸头等,即在、Z理想的条件下进行检测。除质控血清外同时测定阴性对照品和阳性对照品。并作双份测定,得出2 个吸光值(A 值),求出 X。连续作20 次,求出20 个X,即X1……X20。从这20 个数据中,求出OCV 的X 和SD。
2 常规条件下已知值质控血清变异(routine conditions variance-known value,简称RCVK)的测定。做常规检验的技术人员,在常规检验的条件下,将质控血清放在常规检测样本中,进行 20 次检验,结果计算同OCV 法。一般认为RCV 的SD 在OCV 的SD 两倍范围内可以接受。若太大应该查找原因,使其向OCV 的 SD 值靠近。在改进实验室条件后(例如较正加样器,纠正洗板操作,调正温育温度等),重新进行RCVK 的测定。如果RCVK 的S D 值更小,说明OCV 不是条件下测定的,应重新再测OCV。常规条件下,RCVK 肯定要比OCV 大。通过质控控制各项条件, 使 RCVK 的数据尽可能接近OCV 值。RCVK 的数据反映该实验室日常工作的质量,用于作质控图,对室内检验的结果进行控制,每日检验的结果,报告能否发出。
3 常规条件下,未知值质控血清变异(routine conditions variancl-unknown value 简称RCVU)的测定有时为了避免主观性,再作RCVU 测定。
测定步骤同 RCVK,但检测的操作者不知质控血清的定值,或在操作者不知哪份是质控血汪清的条件下进行常规检验,以排除操作者的主观性。在此不再举例说明。
4 质控图
通过以上三步骤,可以开始作室内质控图,根据 RCVK 的和SD 作质控框图。利用质控图可以对每次检验的结果进行监测,当没有更换另一批号试剂盒和另一批号质控血清时,该质控图可以连续作下去。质控血清的 S/CO 值低于-2SD 的范围,属"告警",应寻找原因并在质控图上记录查出的原因。
ELISA 试验中,各种检验项目的误差允许范围均有待在实践中得出结论,以上只是举例说明质控方法,不是定论。2SD 是一般公认的允许误差限度。每批测定放一份质控血清时,一次超过 2SD 应作为"告警",二次超出2SD 为"失控"。当质控过程中,出现失控时,出现失控时,应查找原因,通常是试剂盒或质控血
清失效造成。更换试剂盒或更换质控血清,找出原因纠正后重新检验。如果检验结果仍达不到要求或找不到原因时,应重复进行OCV 的检验。如果OCV 检验的结果仍是好的,说明常规操作出现问题。一般认为:
①一次超出 3SD;②连续二次超出2SD;③3-5 次连续处于一侧的2SD 之内;④5~7 次连续偏向横轴的一侧,均为失控。第③、④ 种情况,单独依靠记录往往是不易察觉的,但在质控图上可以清晰地发现这种失控。
5 统计学计算方法--"即刻性"质控
以上介绍的质控方法基本上与临床化学测定的质控方法相同,但 ELISA 有其特殊性,Z合适的质控方法尚待研究建立。有些实验室不是每天进行ELISA 项目的检验,而ELSIA 试剂盒效期短,用一批号试剂盒连续常规测20 次,难度较大。采用"即刻法"质控统计方法,只需连续测3 次,即可对第3 次检验结果进行质控。" 即刻法"的建立具体计算方法如下:
1)先将测定值从小到大排列
2)计算X 和SD。
3)计算SDI 上限和SDI 下限值。
4)将SDI 上限、SDI 下限值与SDI 值中的数字比较。
当 SDI 上限值和SDI 下限值<n2SD 时,表示处于控制范围内,可以继续往下测定,继续重复以上各项计算;当SDI 上限和SDI 下限有一值处于n2SD 和n2SD 值之间时,说明该值在2SD~3SD 范围,处于"告警"状态;当SDI 上限和SDI 下限有一值>n2SD 时,说明该值已在3SD 范围之外,属"失控"。数值处于"告警"和"失控"状态应舍去,重新测定该项质控血清和病人样本。舍去的只是失控的这次数值,其他次测定值仍可继续使用。
即刻性质控统计方法,适于 ELISA 测定的质控。当检测的数值超过 20 次以后,不必再使用"即刻法"质控统计计算,可以转入常规的质控图的质控。将前20 次的数值求出的和SD 作质控框架图,第2 1 次的数值,依次点入即可。
合作单位
我们的客户群体与合作单位:
国内YL机构:北京大学医院、北京协和医院、上海市中医医院、上海儿童医院、南京军区总院、江苏省中医院、北京仁济医院、济南儿童医院、河北医科大学第二医院、复旦大学医学院儿科医院、第二军医大学肝胆外科医院及长海医院等
国内科研院校:北京大学、复旦大学 、上海第二医科大学、华中科技大学、 中南大学、ZG医科大学、天津医科大学、南京中医药大学、南京医科大学、ZG药科大学、南京农业大学、河北医科大学、哈尔滨医科大学、重庆医科大学、安徽医科大学、东南大学、广西医科大学、新疆医科大学、昆明医学院、 广东医学院等
使用方法
试剂的准备
试剂的准备之洗涤
洗涤在 ELISA 过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELSIA 就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而
在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA 操作中,洗涤是Z主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
洗涤的方式除某些 ELISA 仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下:
(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液;b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2 分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;d.吸干孔内液体。吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;e.重复操作c 和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温 20,其浓度可在0.05%-0.2%
之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
(2)流水冲洗式流水冲洗法Z初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗 2 分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2 分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速。
已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。