脑源神经营养因子/脑衍化神经营养因子_详细资料

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脑源神经营养因子/脑衍化神经营养因子>噬菌体抗体库技术
总体可概括为二个方面
（一）基本程序和原理。噬菌体抗体库技术的原理，简言之就是用PCR技术从人免疫细胞中扩增出整套的抗体重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因，克隆到噬菌体载体上并以融合蛋白的形式表达在其外壳表面。这样一来噬菌体DNA中有抗体基因的存在，同时在其表面又有抗体分子的表达，就可以方便地利用抗原—抗体特异性结合而筛选出所需要的抗体，并进行克隆扩增。使抗体基因以分泌的方式表达，则可获得可溶性的抗体片段。在建库过程中如果将VH和VI。随机组合，则可建成组合抗体文库；如果抗体mRNA来源于未经免疫的正常人，则可以在不需要细胞融合的情况下建立起人天然抗体库。
（二）噬菌体抗体库技术的特点，可细分为三点
1．模拟天然全套抗体库抗体文库可以达到或超过10¹¹库容，所以能包含B细胞全部克隆。建库的外源基因来自人体外周血，或的淋巴细胞提取的mmDNA，mmDNA反转录形成cDNA，这些mRNA是人体多克隆细胞的总mRNA。使用的通用引物采自多个人体，具有人的种属普遍性。抗体的VH和VL基因的随机重组也增加了抗体的多样性。
2．避免使用人工免疫和杂交瘤技术由于抗体库的大容量和极高的筛选效率，使得可以调出任意抗体基因，用基因工程方法制备抗体，从而避免了使用人工免疫动物和细胞融合技术。
3．可获得高亲和力的人源化抗体在噬菌体抗体库技术中，VH和VL基因的随机重组模拟了体内抗体亲和力成熟的过程，所用的抗体基因又来自人体，因此，所产生的抗体必然都是高亲和力的人源化抗体。
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