NanoPro 100 信号转导蛋白磷酸化分析系统NanoPro技术被用来分析信号转导过程中所涉及的蛋白构象上的极细微变化。NanoPro100为结构紧凑的台式分析系统。NanoPro技术可用来分析珍贵的、极少量样本的蛋白表型。传统的蛋白分析技术一般需要数百万个细胞,因而限制其在珍稀细胞群的应用。相比较而言,NanoPro100系统只需要25个细胞即可进行分析,这样即使是珍稀细胞群中的低丰度蛋白也可被检测出来,例如: • 原代培养细胞• 流式分选细胞• 肿瘤针刺提取物
NanoPro 100 信号转导蛋白磷酸化分析系统
NanoPro技术被用来分析信号转导过程中所涉及的蛋白构象上的极细微变化。NanoPro100为结构紧凑的台式分析系统。
NanoPro技术可用来分析珍贵的、极少量样本的蛋白表型。传统的蛋白分析技术一般需要数百万个细胞,因而限制其在珍稀细胞群的应用。相比较而言,NanoPro100系统只需要25个细胞即可进行分析,这样即使是珍稀细胞群中的低丰度蛋白也可被检测出来,例如:
NanoPro技术采用等电点电泳的方法将不同构象的蛋白分离。该方法大大推进了多个领域的研究,包括:
药物开发-筛选激酶YZ剂药物的作用靶点
生物标记物的发现和确认-观察疾病引起的蛋白构象的细微变化,研究其发病机制
肿瘤蛋白活性-研究组织和细胞中肿瘤蛋白的调控机制
翻译后修饰的研究-检测蛋白构象改变引起的等电点极细微的变化
NanoPro 100将蛋白分离与检测技术相结合:
NanoPro将毛细管等电点电泳和化学发光免疫测定这两种常用的蛋白检测技术相结合。等电点电泳可将不同构象的蛋白分离。分离后蛋白被仪器固定在毛细管壁上,接着用化学发光免疫的方法检测蛋白。这为信号转导蛋白的检测提供了新的视角。
操作流程
上样
每个毛细管中加400nl样本混合物,包括样本、荧光标记PI和两性电解质。
分离
毛细管两端加电压,样本中的蛋白质随着自身等电点的不同,加以分离。
固定
毛细管在紫外光照射下,其毛细管壁上的专利化学物质被激活,从而将分离的蛋白异构体固定在毛细管壁上。
免疫标记
用洗脱液将非特异结合的蛋白质洗脱,将固定的蛋白质进行免疫反应,加入发光催化剂诱导其化学发光,发光信号被CCD摄像机拍摄下来。
结果分析
通过专业的软件,对结果进行定量分析
• 原代培养细胞
• 流式分选细胞
• 肿瘤针刺提取物
• 显微切割组织切片
• 胚胎干细胞