总RNA提取试剂盒(TRIpure法)
目录号:1104
目录编号 | 包装单位 |
110401 | 25次 |
110402 | 50次 |
v 试剂盒组成、储存、稳定性:
试剂盒组成 | 保存 | 25次 | 50次 |
TRIpure | 4℃避光 | 25 ml | 50 ml |
氯仿 | 室温 | 5 ml | 10 ml |
异丙醇 | 室温 | 15 ml | 25 ml |
75%乙醇 | 室温 | 25 ml | 50 ml |
RNase-free H2O | 室温 | 10 ml | 10 ml |
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
v 适用范围:
适用于各种动植物组织/细胞总RNA、DNA、蛋白的快速抽提
v 产品介绍:
TRIpure试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。
无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。TRIPURE试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。TRIPURE抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。
TRIpure试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。