克隆感受态价格

克隆感受态价格OP10感受态细胞基因型:
F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15Δ lacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupG
TOP10感受态细胞简要说明:
 TOP10菌株来源于MC1061菌株， 是目前实验室Z常用的感受态细胞之一，基因型与DH10B高度类似（DH10B为galE15型，而TOP10为galU型）。 TOP10生长速度快（比DH5α快，但比Mach1-T1生长速度慢），10小时可见克隆， recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取，可用于构建克隆，蓝白斑筛选等实验，具有链霉素抗性。 High5TM系列TOP10感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率>108cfu/μg。
克隆感受态价格TOP10感受态细胞操作说明书: 1.TOP10感受态细胞放置冰中融化（或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中），加入目 的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少13h。
TOP10感受态细胞注意事项: 1.  感受态细胞Z好在冰上融化。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或GX率的连接产物可相应减少用于涂板的菌量。

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