乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-L比色法)

产品名称：乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-L比色法)
规格：50T/100T
供应商:远慕生物
分类：酶类检测
储存方式：—20℃,避光,6个月
产品用途：又称乳酸速率法,定量检测血清、血浆、组织等样品中的乳酸脱氢酶活性
注意事项：乳酸氧化成丙酮酸,同时NAD+氧化成NADH,引起340nm处吸光度的升高。其升高速率与标本中LDH活性呈正比关系,通过分光光度计或自动分析仪检测340nm处吸光度升高速率,通过计算获得乳酸脱氢酶的活性。该LD-L法的优点是：1、乳酸盐和NAD+底物溶液的稳定性比LD-P法中的丙酮酸和NADH底物溶液好；2、线性速率反应时间范围较宽；3、重复性比LD-P法和二硝基苯肼法好；4、准确性比二硝基苯肼法好；6、适用于自动分析仪。
试剂注意事项：
①试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
②实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
③使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
④加入试剂的顺序一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
⑤按说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。




乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-L比色法)  常见问题以及解决方法：
1、试剂的选择：选择优良试剂大家都是知道的，但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻；
2、加样中可能遇到的问题：在做血清或是血浆用于检测试剂的时候，会碰到血清血浆不好分离的情况，这个时候的解决办法是先放在常温中1到2小时，然后在进行离心处理；
3、洗板时容易造成误差： 因为洗板是人工洗的，所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的，这个时候带有主观色彩，所以多清洗几次，还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动；
4、显色问题： 使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长，都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候，要先查看显色剂本身的情况；
5、终止反应：在加终止剂的时候由于倾倒速度快，差生气泡，造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒；
6、读板：读板的时候首先应该保证板的清洁干净；
7、严格按照说明书操作。



乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-L比色法)   操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50?l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40?l，然后再加待测样品 10?l。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50?l，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50?l，再加入显色剂 B50?l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50?l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。


检测试剂注意事项：
1.  此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。
2． 使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟，
3． 浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。
4． 浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟
5． 若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。
6． 在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低精确度，造成吸光度偏离的假像。
7． 加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。
8． 试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。


特点：
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应，而免疫酶技术以免疫反应为基础，所检测的对象是抗原（或抗体），使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的结合，大大提高了检测的灵敏性，使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定，因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察，又可用显微镜观察，也可以用分光光度计进行比色测定，还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变，从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质，应用酶免吸附技术进行比色测定，依据光密度值的变化，可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测，免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说，不需要荧光显微镜，也不需要测定放射性的特殊仪器，所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂，普通实验室及生产应用单位均易购置.