重庆ELISA试剂盒,大鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA Kit资料

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重庆elisa试剂盒,大鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA Kit资料  长沙ELISA试剂盒,大鼠多巴胺D1受体(D1R)ELISA Kit使用说明书

参数规格：

ELISA试剂盒产品我司提供免费代测，快速检测一周内出结果。小鼠、人、马、大鼠、猪、牛等ELISA试剂盒产品种类齐全，现货供应，质量可靠，是广大科研学者学习研究的伙伴。

用途：用于测定血清、血浆、组织和相关液体样本中的含量或者活性

特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应

存储条件：2-8℃

规格：96T/48T

产品别名：马转化生长因子β2(TGFB2)ELISA定量检测试剂盒，马转化生长因子β2(TGFB2)酶联免疫试剂盒.

96T使用方法:96TELISA检测试剂盒可用作标本90个，标准曲线6个或者用本公司产品作标本94个,标准对照2个。

48T使用方法：48TELISA检测试剂盒可用作标本46个，标准曲线6个或者用本公司产品作标本47个,标准对照1个。

操作流程：

实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。

1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。

为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制)，37℃,60分钟。

3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl，37℃，60分钟。

5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色(30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止)。

7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

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细胞生存条件:

1、基本营养物质

（1）糖

六碳糖主要能源、维持渗透压，含葡萄糖1-5%。

（2）氨基酸

维持生存需12种氨基酸（精、胱、亮、异亮、赖、蛋、苯丙、苏、色、组、酪、缬）。谷氨酰胺需量,缺乏时细胞生长不良。

单细胞培养或细胞量少时,所需氨基酸的种类和量增多，细胞主要利用左旋氨基酸异构体。

（3）维生素

细胞大部分需水溶性B族维生素，Vitc不可少，1-10mg/100ml可促进正常细胞生长繁殖。

2、促生长因子、激素类物质

3、其它物质

基本元素、微量元素、促细胞贴附物质(纤粘连蛋白、层粘连蛋白laminin、IV型胶原、氨基多糖类)

4、水

主要成分和生存环境,要求高纯度水。

5、温度

哺乳动物及人源细胞Z适培养温度为35℃—37℃,对低温耐受力比高温强。39℃以上受损→死亡；不低于0℃时（0℃-34℃），细胞能生存，但代谢降低、分裂延缓。

6、气体环境和pH

需O2、CO2，通氧量过大对细胞有毒害。

CO2主要与维持pH有关，细胞培养pH为7.2—7.4，通过缓冲系统和调节CO2含量，维持正常pH。

开放培养要求5%CO2环境、HEPES(羟乙基乙硫磺酸)10—50mmol/ml可防止pH变化。

含Earle’s缓冲系统的培养基适合于5％CO2的培养条件，Hanks’缓冲系统的培养基仅含有0.35g/L NaHCO3，不能用于5％CO2的环境，若放入CO2培养箱，溶液将迅速变酸，使用时应注意。

7、湿度和光

开放培养相对湿度控制在95%。细胞培养需避光，紫外线或可见光可造成核黄素、酪氨酸、色氨酸等产生有毒的光产物，YZ细胞生长，降低其贴壁能力。

8、影响细胞生长的其它因素

接触橡胶用品、收集细胞时离心速度过大、细胞接种浓度过低等。

主要优点:

一、GX、灵敏、特异的抗体；

二、稳定的重复性和可靠性；

三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；

四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；

五、限度的节省实验经费。

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衣原体

衣原体是动物界很常见的病原体。它们是一种无动力、革兰氏阴性、专性细胞内寄生菌。独特的生长发育周期使之与其它微生物区别开来。它们在宿主细胞的胞浆内复制，形成特征性的细胞内包涵体，光学显微镜下可见。它们既含有DNA也含有RNA，与病毒不同，具有与革兰氏阴性细菌相似的细胞结构。对许多广谱抗生素敏感，含有一定数目的酶，具有严格的代谢能力。

常见问题：

1. 问－－客户用48T试剂盒，大概只有十个样所以他一次用不完那么多板条，但是他想做两次，可封板膜只有一张，那如果用完了怎么办？可以用什么别的东西取代吗？

答－－可以把封板膜剪掉，用多少剪多少也可以用封口膜替代。

2. 问－－实验过程中温育是放在哪温育呢？

答－－可以在水浴箱、细胞培养箱和烘干箱里面都行，只要恒定温度为37度。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

订购说明：

1. 明确检测何种蛋白；

2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性Z好；

3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒；

4. 咨询上海酶远使用的抗体类型；

5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。