新疆ELISA试剂盒,大鼠磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(pACCase)ELISA Kit目前厂家/报价公司自主研发ELISA试剂盒,低价销售。公司原装ELISA试剂盒、进口ELISA试剂盒、国产ELISA试剂盒,免费代测,实验过程提供完整的技术指导,所有试剂盒均经过充分验证,确保有效性重复性。
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参数规格:
ELISA试剂盒产品我司提供免费代测,快速检测一周内出结果。小鼠、人、马、大鼠、猪、牛等ELISA试剂盒产品种类齐全,现货供应,质量可靠,是广大科研学者学习研究的伙伴。
用途:用于测定血清、血浆、组织和相关液体样本中的含量或者活性
特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应
存储条件:2-8℃
规格:96T/48T
产品别名:马转化生长因子β2(TGFB2)ELISA定量检测试剂盒,马转化生长因子β2(TGFB2)酶联免疫试剂盒.
96T使用方法:96TELISA检测试剂盒可用作标本90个,标准曲线6个或者用本公司产品作标本94个,标准对照2个。
48T使用方法:48TELISA检测试剂盒可用作标本46个,标准曲线6个或者用本公司产品作标本47个,标准对照1个。
操作流程:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
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细胞生存条件:
1、基本营养物质
(1)糖
六碳糖主要能源、维持渗透压,含葡萄糖1-5%。
(2)氨基酸
维持生存需12种氨基酸(精、胱、亮、异亮、赖、蛋、苯丙、苏、色、组、酪、缬)。谷氨酰胺需量,缺乏时细胞生长不良。
单细胞培养或细胞量少时,所需氨基酸的种类和量增多,细胞主要利用左旋氨基酸异构体。
(3)维生素
细胞大部分需水溶性B族维生素,Vitc不可少,1-10mg/100ml可促进正常细胞生长繁殖。
2、促生长因子、激素类物质
3、其它物质
基本元素、微量元素、促细胞贴附物质(纤粘连蛋白、层粘连蛋白laminin、IV型胶原、氨基多糖类)
4、水
主要成分和生存环境,要求高纯度水。
5、温度
哺乳动物及人源细胞Z适培养温度为35℃—37℃,对低温耐受力比高温强。39℃以上受损→死亡;不低于0℃时(0℃-34℃),细胞能生存,但代谢降低、分裂延缓。
6、气体环境和pH
需O2、CO2,通氧量过大对细胞有毒害。
CO2主要与维持pH有关,细胞培养pH为7.2—7.4,通过缓冲系统和调节CO2含量,维持正常pH。
开放培养要求5%CO2环境、HEPES(羟乙基乙硫磺酸)10—50mmol/ml可防止pH变化。
含Earle’s缓冲系统的培养基适合于5%CO2的培养条件,Hanks’缓冲系统的培养基仅含有0.35g/L NaHCO3,不能用于5%CO2的环境,若放入CO2培养箱,溶液将迅速变酸,使用时应注意。
7、湿度和光
开放培养相对湿度控制在95%。细胞培养需避光,紫外线或可见光可造成核黄素、酪氨酸、色氨酸等产生有毒的光产物,YZ细胞生长,降低其贴壁能力。
8、影响细胞生长的其它因素
接触橡胶用品、收集细胞时离心速度过大、细胞接种浓度过低等。
主要优点:
一、GX、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、限度的节省实验经费。
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衣原体
衣原体是动物界很常见的病原体。它们是一种无动力、革兰氏阴性、专性细胞内寄生菌。独特的生长发育周期使之与其它微生物区别开来。它们在宿主细胞的胞浆内复制,形成特征性的细胞内包涵体,光学显微镜下可见。它们既含有DNA也含有RNA,与病毒不同,具有与革兰氏阴性细菌相似的细胞结构。对许多广谱抗生素敏感,含有一定数目的酶,具有严格的代谢能力。
常见问题:
1. 问--客户用48T试剂盒,大概只有十个样所以他一次用不完那么多板条,但是他想做两次,可封板膜只有一张,那如果用完了怎么办?可以用什么别的东西取代吗?
答--可以把封板膜剪掉,用多少剪多少也可以用封口膜替代。
2. 问--实验过程中温育是放在哪温育呢?
答--可以在水浴箱、细胞培养箱和烘干箱里面都行,只要恒定温度为37度。
注意事项:
1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
订购说明:
1. 明确检测何种蛋白;
2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性Z好;
3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒;
4. 咨询上海酶远使用的抗体类型;
5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。