小鼠抗人IgE杂交瘤细胞；mAbhIgE-512说明书

小鼠抗人IgE杂交瘤细胞；mAbhIgE-512说明书对于悬浮细胞传代方法：方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶

注意事项：

1. 收到小鼠抗人IgE杂交瘤细胞；mAbhIgE-512说明书 后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们。

2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
细胞名称 小鼠抗人IgE杂交瘤细胞；mAbhIgE-512说明书

形态特性 淋巴母细胞样

生长特性 半贴壁生长

特征特性

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

传代方法 保持细胞密度在1×105～1×106 cells/ml之间，每周换液2～3次

传代情况

冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

小鼠抗人IgE杂交瘤细胞；mAbhIgE-512说明书【培养指南】

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

小鼠抗人IgE杂交瘤细胞；mAbhIgE-512说明书【细胞冻存】

待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

小鼠抗人IgE杂交瘤细胞；mAbhIgE-512说明书【复苏的原则】

快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

小鼠抗人IgE杂交瘤细胞；mAbhIgE-512说明书实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。

pD-缬酸shēng huà shì jì容量：RT，避光5克

64872-77-1布康唑Butoconazole nitnate

2,3,5-Trimetxylthiopxene 1795-05-7

2-基-6-羟基-8-巯... 2-Amino-6-hydroxy-8-mercaptopurine,97% 28128-40-7 250MG 表面活性剂

十四醋 ≥98.0% (GC) 十四醋 Myristic ccid 244-63-8

间酸25毫克

591-17-33-溴;间溴3-BroMotolue;3-BroMo-1-metxylbenzene;M-Tolyl broMide

etxyl 2-amino-4-(4-chloropxenyl)-5-metxyl-3-thiopxenecarboxylate 350989-77-4

亚麻酸乙酯 Ethyl linolenate,80% 1191-41-9 25ML 通用试剂

二[4-(氧代缩水甘油)本基]烷 Nc

聚醇缩丁醛树脂，英文名或英文缩写：PVB，级别：ACS，99.8%，规格：25克

5949-29-1柠檬酸一水合物Citric acid monohydrate

百里香酚，英文名或英文缩写：Thymol，级别：BR，95%，规格：30毫升

1-基环丙基盐酸盐 1-Amino-1-cyclopropanecarbonitrile hyd... 127946-77-4 1G 通用试剂

羊抗人纤维蛋白原 (... Anti-Human Fibrinogen-FITC produced in... Null 1ML FITC荧光抗体

大肠杆菌显色培养基CRM002l大肠杆菌显色培养基用于大肠杆菌的快速检测和计数

L-Trptophan L-色氨酸 Japan 25g incubation media L-Trptophan L-色氨酸 Japan 25g

灵芝(红芝，赤芝) 降低糖蜜废水 支/瓶

盐胱酸增菌液(SC)20支/包用于沙门氏菌选择性增菌培养

青霉素酶制备培养基

我妻氏血平板9cm用于神奈川现象试验

果蝇培养基 250g 用于果蝇的人工培养

1%亚碲酸溶液 5ml*10 适量添加于HB0121

溴紫乳糖琼脂250g/瓶用于分离发酵乳糖的细菌incubationmedia溴紫乳糖琼脂250g/瓶用于分离发酵乳糖的细菌

FuchsinBasicSodiumSulfideAgar

D-缬酸5克RT，避光

(支链淀粉)

盐酸，英文名或英文缩写：Pyridine xy7nochloride，级别：AR，88%，规格：5克

三录化锑(*);录化亚锑;录化锑 cntiMonous chloridq;trichloro-Stibinq 1002-91-9

AntibodySignalEnhancer抗体信号增强剂蛋白组学级透明液体，摇晃时有气泡RTsigma

间羟基本酸shēng huà shì jì容量：10克

碳酸氢钠粉末NA

4-本硼酸，英文名或英文缩写：4-Vinylpxenylboronic acid，级别：CP，85%，规格：100克

2-溴-5-三 2-Bromo-5-chlorobenzotrifluoride,97% 344-65-0 5G 通用试剂

己二酸二乙酯/肥酸乙酯/己二酸乙酯/Diethyl adipate CP，99% 500毫升 国产/进口

聚醇缩丁醛100克

90小鼠抗人IgE杂交瘤细胞；mAbhIgE-512说明书05-64-5吐温 20TWEEN20

5-AMP琼脂糖凝胶4B30U

2,3-二溴苯 1-Bromo-2,3-difluorobenzene,98% 38573-88-5 1G 通用试剂

肌酐/肌酸酐/肌基酐/2-基-1-甲基咪唑啉-4-酮/缩水肌肉素/2-基-1,5-二氢-1-甲基-4H-咪唑啉-4-酮/Creatinine BR，99% 25克 国产/进口

有机磷细菌培养基250g用于测定磷细菌肥料中磷细菌分解有机磷的的效能

Lysine Iron Agar incubation media Lysine Iron Agar

白色葡萄球菌 支/瓶

含225ml磷酸盐缓冲液均质袋用于菌落总数，大肠菌群，金葡菌，大肠杆菌样品制备

乳糖胆盐培养基 250g 用于化妆品中粪大肠菌群的测定(GB标准)

缓冲蛋白胨水(BPW)250g用于沙门氏菌前增菌培养，亦可用于李氏菌前增菌培养(GB、SN标准)

硅酸盐细菌培养基(含琼脂) 250g 用于硅酸盐细菌的分离培养

培养基 Lead Acetate Medium 250 用于试验

酸性肉汤250g/瓶用于酸性罐头食品无菌检验incubationmedia酸性肉汤250g/瓶用于酸性罐头食品无菌检验

结晶紫中性红胆盐琼脂平板(9cm) 10个/包 用于大肠菌群的固体平板检测