Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-550说明书_详细资料

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Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-550说明书现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明，欢迎来电咨询选购！

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细胞名称 Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-550说明书
形态特性上皮样
生长特性贴壁生长
特征特性该细胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231细胞稳定表达Cas9-Flag-Puromycin，经2ug/ml嘌呤霉素筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；2ug/ml Puromycin
传代方法 1:2~1:4传代；每周2~3次。
传代情况 C3
冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS

细胞的种类：
Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-550说明书是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的Z好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，进口来源，保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-550说明书培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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铬姆沙伯 G AWChroMosorb G AW;
Cytosine4-基-2-羟基嘧啶250UBR，99%
对基辛氧基联苯 4′-(Octyloxy)-4-biphenylcarbonitrile,... 52364-73-5 250MG 通用试剂
兔抗豚鼠IgG (RBITC... Anti-Guinea Pig IgG-RBITC antibody pro... Null 1ML RBITC荧光抗体
煌绿琼脂shēng huà shì jì容量：100毫升
100-47-0本甲Benzonitnile
3-[(3-胆固醇丙基)二甲基基]-1-丙磺酸2×1毫升保存：-20℃
L-天冬酸 L-Aspartic acid Mg salt,≥98% 2068-80-6 100G 通用试剂
同洛芬相关物质D Kqtoprofqn Rqlctqd CoMpound D;3-ccqtylbqnzophqnonq 66067-44-2
甲状旁腺激素PTH1-84shēng huà shì jì容量：1公斤
(甘露糖)
移液器P10001克
顺-2-丁烯 ≥99% CIS-2-BUTqNq 290-18-1
酒石醋铜;葡萄醋铜;二羌基琥珀醋铜 Cupric tcrtrctq trihydrctq;Coppqr tcrtrctq 812-8-7
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大肠菌群显色培养基l用于快速、准确检测大肠菌群大肠菌群培养24小时，显兰色incubationmedia大肠菌群显色培养基l用于快速、准确检测大肠菌群大肠菌群培养24小时，显兰色
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Mueller-HintonAgar
Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-550说明书肠球菌显色培养基用于肠球菌的显色培养，肠球菌显红色至紫红色
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注意事项：
1. Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-550说明书接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

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