以甘油、二甲基亚砜等作为保护剂，在液氮超低温（-196℃）下保藏。其主要原理是菌种细胞从常温过渡到低温，并在降到低温之前，使细胞内的自由水通过细胞膜外渗出来，以免膜内因自由水凝结成冰晶而使细胞损伤。此法操作简便、GX、保藏期一般可达到15年以上，是目前被公认的Z有效的菌种长期保藏技术之一。
瘤细胞，SP2/0细胞NCI-N87细胞，人胃癌细胞
ZG仓鼠卵巢细胞，CHO细胞DT40细胞，鸡淋巴瘤细胞
非洲绿猴肾细胞，VERO细胞ECV304细胞，人脐静脉内皮细胞株
鼠巨噬细胞，Ana-1细胞PA317细胞，鼠胚胎成纤维细胞
白血病单核细胞，J－1111细胞SP2/0细胞，瘤细胞
单核细胞巨噬细胞，J774A1细胞CHO细胞，ZG仓鼠卵巢细胞
肺腺癌细胞，SPA-A1细胞VERO细胞，非洲绿猴肾细胞
横纹肌瘤细胞，A673细胞Ana-1细胞，鼠巨噬细胞
正常肝细胞，L-02细胞J－1111细胞，白血病单核细胞
7721肝癌细胞，7721细胞J774A1细胞，单核细胞巨噬细胞
神经母细胞瘤，SK-N-SH细胞SPA-A1细胞，肺腺癌细胞
白血病原髓细胞，HL-60细胞A673细胞，横纹肌瘤细胞
膀胱鳞癌细胞，ScaBER细胞L-02细胞，正常肝细胞
羊膜细胞，WISH细胞7721细胞，7721肝癌细胞
卵巢癌细胞，H08910细胞SK-N-SH细胞，神经母细胞瘤
乳腺癌细胞，Bcap-37细胞HL-60细胞，白血病原髓细胞
宫颈癌细胞，Hela细胞ScaBER细胞，膀胱鳞癌细胞
胃腺癌细胞，SGC7901细胞WISH细胞，羊膜细胞
肾透明细胞腺癌，786－0细胞H08910细胞，卵巢癌细胞
T细胞白血病，6T－CEM细胞Bcap-37细胞，乳腺癌细胞
淋巴瘤细胞，Jecket细胞Hela细胞，宫颈癌细胞
胚绒毛癌细胞，JAR细胞SGC7901细胞，胃腺癌细胞
人二倍体胚肺细胞，WI-38细胞786－0细胞，肾透明细胞腺癌
人单核细胞，THP-1细胞6T－CEM细胞，T细胞白血病
菩提奇异球菌品Pai膀胱变移细胞癌，T-24细胞Jecket细胞，淋巴瘤细胞
人类恶性黑色素瘤，A375细胞JAR细胞，胚绒毛
菩提奇异球菌品Pai低温存法
①简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1～2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3～4个月；②液氮超低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法长期保存。
菩提奇异球菌品Pai使用范围:
（1）合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，酿酒酵母菌组成成分精确，重复性强，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。
（2）天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，培养效果好，所以常被采用。
（3）半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
