大鼠神经纤毛蛋白1(Neuropilin-1)elisa检测试剂盒成功案例

泉州市睿信生物科技有限公司是集研发、生产、销售、服务及品Pai代理为一体的生物技术公司，目前可提供各种抗体、免疫学试剂盒、生化试剂、分子生物学试剂等高品质产品及服务，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。依托湖北武汉、江苏南京、福建泉州三大研发及销售ZX，布局全国市场。 

我们致力于为高等院校、研究机构、诊断试剂厂家、生物制药公司、动物造模公司等科研单位，提供高质量检测试剂盒、方法学开发及实验外包服务，为客户的科学研究提供可靠的技术支持。公司骨干技术人员均有10年以上的从业经验，是值得您信赖的科研伙伴！

企业建立了完善的研发系统和生产设备，并与知名高校、研究机构、ZD企业等建立战略合作关系。公司自成立以来，就非常注重企业信息化的建设，我们采用了先进的内部供应链信息处理平台，保证客户的需求可以准确、GX处理。
为每一位科研人员献上高品质的产品及服务是我们的使命。

检测范围：以说明书为准

检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。颜色的深浅和样品中的浓度呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

保存：2-8℃

有效期：6个月

样本量：10ul-100ul

检测波长：450nm

适用范围：仅供科研使用，不得用于临床诊断

睿信生物供应种属：人，大鼠，小鼠、兔子、猪、犬、牛、羊、鸡、鸭、植物等

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.  样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃ 水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
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1.   严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2.   洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3.   消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4.   底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

5.   避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6.   在储存和温育时避免强光直接照射。

7.   平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8.   任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9.   不能使用过期产品。

10. 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。

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由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析，本产品可能存在一定的质量技术风险。

1.   *终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关，请务必准备充足的标本备份。

2.   不同批次的同一产品可能会有少许差别，如：检测限、灵敏度以及显色时间等，请依据试剂盒内说明书进行实验操作，网站电子版说明书仅作参考。

3.   只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果，不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到*佳的检测结果。

4.   本公司只对试剂盒本身负责，不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责，请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量，预留充足的样本。

5.   使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。

6.   若样本为细胞培养上清，因该类样本干扰因素较多，如：细胞状态、细胞数量、采样时间等，所以可能存在检测不出的情况。

7.   某些天然蛋白或重组蛋白，包括原核及真核重组蛋白，可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配，而不被检测出。

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①对于血清或血浆样品，在加入样品及标准之前，每一个样品及标准需加入50μl检测稀释液RD1。注：非血清或血浆样品不需要加此试剂。

②每孔加入200μl的标准或样品，室温孵育2h。

③吸干，每孔加入400μl洗液，洗4次。残余液以干净的吸水纸吸干。

④每孔加入HRP标记的IL-3多克隆抗体200μl，室温孵育2h。

⑤重复③洗板。

⑥每孔加入底物液200μl，室温孵育20min。

⑦每孔加入终止液50μl，混匀。

⑧30min内在分光光度仪上测定每孔的吸光度A450nm。如果不需要波长校正，设于540nm或570nm。如果需要波长较正，则需用540nm或570nm）的A值减去450nm处的A值。

（4）结果计算：平行孔取平均值，并将样品的A值减去零标准A值。

以各标准IL-3浓度对其相应的A值作图。将数据在Log/Log坐标纸上线性化并回归分析。