稳定细胞系筛选

稳定细胞系筛选
研究某个基因的功能常用的手段是在宿主细胞中过量表达或者通过RNA干扰的方法knock-down该基因，常规手段有瞬时转染和筛选稳定细胞系。筛选出该基因的过表达或者RNA干扰的稳定细胞系会给您的实验带来极大的便利。有了稳定细胞系，后期的Co-IP或者Pull-Down实验会非常便利；稳定表达重组荧光蛋白的细胞系可以让您动态的观察分子在细胞中的运动。
筛选稳定细胞系有两种方法：1）转染质粒后，单克隆方法筛选稳定细胞系；2）慢病毒感染筛选稳定细胞系。慢病毒感染方法较质粒转染筛选单克隆方法更方便和GX，是目前主流的稳定细胞系筛选方法。我们提供病毒包装服务（您可以自己完成稳态细胞筛选），或者一站式的稳定细胞系的筛选服务。
服务流程
1.   客户提供宿主细胞，并明确告知基因号或者基因序列（表格下载）；
2.   表达载体或者干扰载体构建；
3.   包装慢病毒；
4.   慢病毒感染，筛选稳定细胞系。
服务周期和价格

		服务价格 （人民币：元）	服务周期 （工作日）
过表达稳定细胞系	基因钓取	1000-3000	5
	载体构建	2000	7（含测序验证）
	病毒包装	6000	10
	筛选稳定细胞系	4000-6000	15
干扰稳定细胞系	载体构建	2000	5
	筛选有效干扰片段（3）	3000	7（含测序验证）
	慢病毒包装	6000	10
	筛选稳定细胞系	4000-6000	15

技术优势
·    丰富的基因库资源，节省了您的时间和金钱；
·    各种表达载体，多种启动子选择，多种筛选标记，多种荧光选择，多种荧光蛋白和目的基因的共表达方式，量身定做您需要的稳定细胞系，您可以在同一株细胞中过表达或者干扰掉多个基因，还可以给您提供调控表达的稳定细胞系。
慢病毒载体信息
本公司慢病毒表达载体主要是世界上各个实验室使用的主流载体，为哈佛医学院、麻省理工学院等机构的知名实验室构建（Science.2008 Jun 13.320(5882):1496-501.）。
·    可供选择的目的基因的启动子有：

目的基因启动子	表达量	适用范围
EF1	一般	多种细胞，包括初级分化细胞
CMV	高	多种细胞
MSCV	高	造血细胞、干细胞

·    可供选择的目的基因与荧光蛋白的共表达方式有：
o   融合表达，IRES连接和T2A peptide。
·    可供选择的荧光蛋白有：
o   EGFP，RFP和mcherry。
·    可供选择的抗性筛选标记有：
o   puromycin、hygromycin和Blasticidin。