猕猴骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)酶联免疫分析试剂盒

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一、猕猴骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)酶联免疫分析试剂盒实验原理

8月23日消息，据上海臻科午间发表：猕猴骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)酶联免疫分析试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被猕猴骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的猕猴骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

二、猕猴骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)酶联免疫分析试剂盒产品优势

1、优点明显  产品具有灵敏度高、特异性强的特点，具有稳定的重复性，吸附性能好,空白值低，并适用于血清血浆 组织匀浆等多种样本类型的检测，方法简单，操作方便，限度的节省了实验经费。

2、品质保障  产品保证质量，出库质检把控严格，保障提供给客户的是优质产品，运输全程跟踪，公司承诺有任何质量问题包退换，诚信经营，合作共赢。

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4、免费代测  公司承诺订购ELISA试剂盒，享全程技术指导并可免费代测，为您分忧。全程有专业技术老师负责代测，收到样本一般7个工作日出结果。

5、服务周到  设立售后服务ZX，24小时及时响应，真正做到后顾无忧，不断完善服务体系。

三、猕猴骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)酶联免疫分析试剂盒标本要求

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

四、猕猴骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)酶联免疫分析试剂盒操作流程

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

五、猕猴骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)酶联免疫分析试剂盒注意事项

1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

2.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

3.请每次测定的同时做标准曲线，Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）。

4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

5.底物请避光保存。

6.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

7.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

8.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

六、猕猴骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)酶联免疫分析试剂盒常见问题分析

ELISA试剂盒用户：为什么96T 的试剂盒只能检测85个样本，测双标准有什么好处？   

臻科生物解答：去掉一个空白和10个标准孔，96T 只能检测85个样本。双标准对照会比单标准测的更加精确。

ELISA试剂盒用户：elisa试剂盒不知道浓度怎么办？

臻科生物解答：每个试剂盒都是有对应的检测范围，比如试剂盒的范围50-1800Pg/ml ，如果样本高于这个检测范围就需要稀释，如果低于这个检测范围那就测不出来了。实验前可以先做个预实验摸索下检测范围。

ELISA试剂盒用户：ELISA试剂盒用什么仪器 对使用什么样的仪器有具体要求吗？ 

臻科生物解答：ELISA试剂盒检测是配套酶标仪的，对酶标仪没有要求。

ELISA试剂盒用户：生物试剂与ELISA试剂盒的分别不同在哪?

臻科生物解答：ELISA试剂盒就是把该实验需要的试剂按一定用量和比例组合起来的成品.一般都是按做多少次的用量包装.生物试剂那就多了,包装大小也五花八门.

ELISA试剂盒用户：elisa试剂盒可以做临床吗？

臻科生物解答：elisa试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断，如果你是临床的标本做课题实验完全没问题。 检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

ELISA试剂盒用户：我有98个样本需要多少用几个盒子？

臻科生物解答：我们试剂盒是 48T 96T 两种规格 可以分别检测 37 85个样本，你需要一个 48T和一个96T 盒子。

ELISA试剂盒用户：收集血清的时候用什么管子？    

臻科生物解答：血清一般是用促凝管，普通离心管或者EP管都可以。

ELISA试剂盒用户：ELISA试剂盒中48T和96T的区别是什么？ 

臻科生物解答：48T和96T代表试剂盒的规格；48T 96T 可以分别检测37 85个样本。

ELISA试剂盒用户：一个孔需要多少量的血清？   

臻科生物解答：每个样本的保险量是50ul，实际上样量是10ul考虑到损耗建议至少准备30ul的样本。

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