突变型Cas9稳定表达的人肝腹水腺癌细胞；SK-HEP-1-mCas9-736培养

突变型Cas9稳定表达的人肝腹水腺癌细胞；SK-HEP-1-mCas9-736培养操作步骤：

1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。

3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。

5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。

6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。

7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。

8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。

9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。

10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。

11. 镜检观察。

突变型Cas9稳定表达的人肝腹水腺癌细胞；SK-HEP-1-mCas9-736培养培养温馨提示：

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 英文名称：4＇-Demethyl-3,9-dihydroeucominCAS：107585-77-35,7-二羟基-3-(4-羟基苄基)色满-4-酮用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C16H14O5纯度：≥98%植物来源：

英文名称：5,7-DiacetoxyflavoneCAS：6665-78-75,7-二乙酰氧基黄酮用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C19H14O6纯度：≥95%植物来源：

英文名称：7,4＇-Di-O-methylapigenin 5-O-xylosylglucosideCAS：221257-06-37-甲氧基-2-(4-甲氧基苯基)-5-[(6-O-BETA-D-吡喃木糖基-BETA-D-吡喃葡萄糖基)氧基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C28H32O14纯度：≥90%植物来源：

英文名称：7-Hydroxy-5,8-dimethoxyflavanoneCAS：54377-24-17-羟基-5,8-二甲氧基黄烷酮用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C17H16O5纯度：≥95%植物来源：

英文名称：9-DeoxygoniopypyroneCAS：136685-37-59-脱氧基哥纳香吡喃酮用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C13H14O4纯度：≥95%植物来源：

M0041α-半乳糖苷酶/α-D-半乳糖苷半乳糖水解酶/蜜二糖酶/α-Galactosidase preparation from green coffee beans，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai，9025-35-82～8℃BR，9u/mg5U

，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai，50U

 

中文名称： α-半乳糖苷酶 

其他中文名称： α-D-半乳糖苷半乳糖水解酶；蜜二糖酶 

英文名称： α-Galactosidase preparation from green coffee beans 

产品规格： BR，9u/mg 

包装： 5U/50U

CAS号：9025-35-8 

级别：BR

分子量：约37.3KDa

活力：≥9units/mg protein 

突变型Cas9稳定表达的人肝腹水腺癌细胞；SK-HEP-1-mCas9-736培养活力定义：One unit will hydrolyze 1.0 μmole of p-nitrophenyl α-D-galactoside to p-nitrophenol ａnd D-galactose per min at pH 6.5 at 25℃

Protein by lowry：4.5～5.0mg protein/ml

性状：悬浮液，Suspension in 3.2 M (NH4)2SO4 solution, pH 6.0, containing BSA

用途：生化研究。利用 α-半乳糖苷酶的转移酶活性，可改造环糊精

保存：2～8℃