3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
人非小细胞肺癌细胞;HCC827操作步骤细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
HPLC≥98%,20mg/支长春碱Changchun?alkali
HPLC≥98%,20mg/支;酒石酸长春瑞滨Changchun?vinorelbine?tartrate
HPLC≥98%;20mg/支长春瑞滨Changchun?vinorelbine
HPLC≥98%,20ml/支甘油三油酸酯Three oleic acid?ester?of glycerol
HPLC≥98%;20mg/支路路通内酯;路路通酸内酯Passepartout?lactone;?liquidambaric acid?lactone
HPLC≥98%,10mg/支28-去甲基-β-香树脂酮28-?to?methyl?- beta -?amyrenone
HPLC≥98%,20mg/支岩大戟内酯B;南大戟内酯BRock?Euphorbia?ginkgolide B;?ginkgolide B?South?Euphorbia
HPLC≥98%,100mg/支尿囊素Allantoin
HPLC≥98%;20mg/支野马追内酯BEupatorium lindleyanum?lactone B
HPLC≥98%;20mg/支野马追内酯AEupatorium lindleyanum?lactone A
HPLC≥98%;20mg/支α-乳香酸Alpha?boswellic acid
HPLC≥99%;100mg/支琥珀酸;丁二酸Succinate;?succinic acid
HPLC≥98%;20mg/支盐酸去氢骆驼蓬碱Harmine hydrochloride