秋水仙碱厂家

名称：秋水仙碱厂家
英文名：Colchicine
产地：国产|进口
品Pai：百奥莱博
编号：QN0239
本品秋水仙素为植物培养级别，广泛应用于细胞分裂，细胞凋亡，癌症ZL，KY等方面研究。

别名：秋水仙素
CAS号：64-86-8
分子式：C22H25NO6
分子量：399.44
储存条件：室温避光保存
纯度：95% (HPLC)
性状：白色粉末
溶解性：易溶于乙醇、氯*(代＇仿＇)，溶于水、乙*(代＇醚＇)、苯。溶于乙醇后颜色由黄色变为黄绿色，溶液由澄清变浑浊，参考浓度为50 mg/ml。

秋水仙碱一种生物碱，因Z初从百合科植物秋水仙中提取出来，故名，也可以从番红花或其他秋水仙碱植物中获得。秋水仙碱通过结合微管YZ微管聚合，破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期。这种由秋水仙碱引起的不正常分裂，称为秋水仙碱有丝分裂。在这样的有丝分裂中，染色体虽然纵裂，但细胞不分裂，不能形成两个子细胞，因而使染色体加倍。秋水仙碱YZ有丝分裂常见使用浓度为0.1-1µg/ml。

秋水仙碱能YZ有丝分裂，破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期;用于植物遗传学和癌症研究。

注意事项:
(1)用于细胞实验，溶解后，须用一次性针头滤器过滤CJ。
(2)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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·DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)
编号：QN1162
英文名称：Western Blotting Mouse IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
规格：1盒
本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色，含有抗小鼠IgG酶标二抗。

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。

试剂盒组分：
封闭试剂————————————30g
10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
酶标二抗————————————0.5ml，效价1:500～3000
20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。

常规电泳转膜后:
1) 清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜，封闭液内，摇床震动，室温封闭30min。用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量，按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口， 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次10min。
8) 配制DAB 显色：根据用量，取TBS-T 4ml，加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul，混匀，加在膜正面，室温下显色。在目标条带显出后，而且背景未出时，放入水中终止显色。

注意事项：
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
2. western blotting DAB显色法操作简单，但其敏感性与ECL发光发有一定的差距，一般只适用于丰度较高的蛋白。
3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长漂洗次数与时间。如果条带过弱，可延长抗体孵育时间。
4. 如果完全没有条带，请检查前期蛋白处理及实验过程， 如果确认无误，反复两次依旧无结果，请换用ECL发光法显色。
5. TBS-T（0.01M）配制方法：称取NaCl 8.5g ，Tris 1.21g ，用800ml 的双蒸水溶解，用盐酸调PH 到7.6，再加入0.5ml Tween－20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）

储存条件：-20℃避光，有效期一年。


秋水仙碱厂家