硫酸新霉素试剂厂家现货由老牌试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持,本产品用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多硫酸新霉素试剂等抗生素类产品请联系我司咨询订购。
名称:硫酸新霉素试剂厂家现货
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:QN0084
英文名:Neomyein Sulfate
本品是一种光谱氨基糖苷类抗生素,广泛用于分子生物学和细胞培养中,可用来筛选具有抗性基因(neo)的原核生物。硫酸新霉素与引起错编的 30S 和 50S(有时为 50S)亚基结合,从而YZ蛋白质合成的开始和延长。
CAS:1405-10-3
分子式:C23H46N6O13·3 H2SO4·xH2O
分子量:908.88(无水)
储存条件:室温
性状:白色或浅黄色结晶性粉末
别名:新霉素硫酸盐;硫酸新链丝菌
KJ谱:革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
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·DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)
编号:QN1162
英文名称:Western Blotting Mouse IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
规格:1盒
本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色,含有抗小鼠IgG酶标二抗。
SDS-PAGE电泳后,蛋白质按照分子量大小分离,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记的第二抗体起反应,经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。
试剂盒组分:
封闭试剂————————————30g
10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
酶标二抗————————————0.5ml,效价1:500~3000
20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。
常规电泳转膜后:
1) 清洗转印膜:将膜剥离下后,作好标记,一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS,防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计,配制膜封闭液,配好的膜封闭液为乳白色悬液,将漂洗过的转印膜,封闭液内,摇床震动,室温封闭30min。用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次5min。
3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水,混匀,可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注:如果所加一抗不同,可在此步将膜沿电泳方向剪成条,分别作好标记,分开孵育。
5) 用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次5min。
6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量,按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例,配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中,加入二抗工作液,封口, 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7) 用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次10min。
8) 配制DAB 显色:根据用量,取TBS-T 4ml,加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul,混匀,加在膜正面,室温下显色。在目标条带显出后,而且背景未出时,放入水中终止显色。
注意事项:
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
2. western blotting DAB显色法操作简单,但其敏感性与ECL发光发有一定的差距,一般只适用于丰度较高的蛋白。
3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深,可延长膜封闭时间,加长漂洗次数与时间。如果条带过弱,可延长抗体孵育时间。
4. 如果完全没有条带,请检查前期蛋白处理及实验过程, 如果确认无误,反复两次依旧无结果,请换用ECL发光法显色。
5. TBS-T(0.01M)配制方法:称取NaCl 8.5g ,Tris 1.21g ,用800ml 的双蒸水溶解,用盐酸调PH 到7.6,再加入0.5ml Tween-20,用双蒸水加至1000ml,混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
硫酸新霉素试剂厂家现货
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