PR萤火虫荧光素酶报告基因质粒厂商

名称：PR萤火虫荧光素酶报告基因质粒厂商
产地：国产|进口
规格：1μg
英文名：Progesterone receptor luciferase reporterplasmid
编号：SY0068
PR-Luc荧光素酶报告基因（报告基因质粒）（PR luciferase reporter plasmid）是用于检测PR转录活性水平为目的的报告基因。PGR(progesterone receptor)主要介导孕酮的生理作用。孕酮是动物内分泌系统、免疫系统、经血调控、组织修复与再生、炎症反应、血管发生、胚泡着床与维持妊娠交互作用的关键因子，尤其在动物生殖活动中起着非常重要的作用。

PR报告基因主用于检测细胞中的孕酮受体、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMPR-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个PR结合位点，可以高灵敏度地检测PR的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得PR报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
1. pGMPR-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
2. PR的激活剂，可作为PR报告基因的阳性对照。

储存条件：-20℃。

关于PR萤火虫荧光素酶报告基因质粒厂商的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以Z饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·5-溴脱氧尿嘧啶核苷
编号：SY0504
英文名称：5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU)
规格：100mg
目前常用的细胞增殖标记物有4种，DNA聚合酶α（DNA polymerase α），增殖细胞核抗原（Proliferating cell nuclear antigen，PCNA），Ki-67和5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）。其中Brdu为组织细胞非内源性表达存在，应用相对较广。Brdu，也称为溴化去氧尿苷，一种合成的胸苷类似物，在S期可替代胸腺嘧啶核苷选择性结合到细胞DNA中。从而检测细胞DNA合成和标记细胞分裂，凋亡等行为。在遗传研究中Brdu可通过活体注射或细胞培养加载，然后使用抗Brdu的单克隆抗体进行特异性标记，ICC或IHC法染色法显示增殖细胞。另外，还能同时结合其它细胞标记物，双重染色，来判断增殖细胞的种类，增殖速度等，对研究细胞动力学有着重要意义。

CAS：59-14-3
分子式：C9H11BrN2O5
分子量：307.10
外观：白色或类白色粉末
熔点：187～189℃
纯度（Purity, HPLC）：≥99%
溶解性：溶于1M 氢氧化铵（50 mg/ml），水（高达10 mg/ml）；溶于DMF，DMSO，水（加热）（50-100 mg/ml）
储存条件：-20℃，有效期2年
结构式


·1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶YZ剂)
编号：SY0321
英文名称：1×RIPA Lysis Buffer (Strong),without enzyme inhibitors
规格：100ml
本品为裂解强度相对较强的RIPA裂解液（1×），裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。

注意事项

1）本品不含蛋白酶/磷酸酶YZ剂，使用前请根据实验情况添加合适酶YZ剂。
2）裂解样品的所有步骤均需在冰上或4℃进行。
3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

(一) 培养细胞样品：
1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF等YZ剂，使PMSF的浓度为1mM。
【注】：请根据实验情况选用酶YZ剂。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

（二）组织样品：
1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF等YZ剂，使PMSF的浓度为1mM。
【注】：请根据实验情况选用酶YZ剂。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
【注】：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。


PR萤火虫荧光素酶报告基因质粒厂商