GRE荧光素酶报告基因质粒(糖皮质激素响应元件) 克隆与表达

名称：GRE荧光素酶报告基因质粒(糖皮质激素响应元件) 克隆与表达
规格：1μg
产地：国产|进口
英文名：GRE-luc Reporter gene plasmid
编号：YT448
GRE报告基因质粒是用于检测糖皮质激素响应元件(glucocorticoid response element, GRE)转录激活水平的报告基因质粒。GRE质粒是以pGL6质粒为模板，在其多克隆位点插入了多个GRE位点，可以高灵敏度地检测GRE的激活水平，检测糖皮质激素介导的信号途径(glucocorticoid-mediated signaling pathway)的激活水平。

pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进，一方面对于luciferase的编码进行了改进，确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达，同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理，在保持原有功能不变的情况下，使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到。

GRE质粒的主要信息如下：

Base pairs	5615
Glucocorticoid response element (GRE)	26-70
luc2 reporter gene	116-1768
SV40 late poly(A) signal	1803-2024
SV40 early enhancer/promoter	2072-2490
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region	2515-3309
Synthetic poly(A) signal	3334-3382
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region	3449-3468
ColE1-derived plasmid replication origin	3706
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region	4497-5357
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	5462-5615
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region	5564-5583

GRE质粒的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. GRE可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒（YT273）。
3. 糖皮质激素可以激活GRE，可以用作GRE报告基因检测时的阳性对照。

储存条件：-20℃。

更多有关GRE荧光素酶报告基因质粒(糖皮质激素响应元件) 克隆与表达的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销售以下产品：

·磷酸酯酶YZ剂(Sodium orthovanadate)(正钒酸钠)
编号：YT350
英文名称：phosphatase Inhibitor
规格：2g
本品是一种常用的磷酸酯酶YZ剂，可以YZ碱性磷酸酯酶、酸性磷酸酯酶、蛋白酪氨酸磷酸酯酶等磷酸酯酶。Sodium orthovanadate也可以YZNa+/K+ ATPase等ATPase。常用于YZ蛋白去磷酸化或促进蛋白的磷酸化激活，在提取细胞或组织蛋白时常用于保持蛋白的磷酸化状态。

Sodium orthovanadate在酸性条件下，例如pH3.75，可以形成十钒酸盐(Sodium decavanadate)。Sodium decavanadate可以YZinositol 1,4,5-trisphosphate-(IP3)诱导的钙离子释放，并可以YZIP3和其受体的结合。在过氧化氢存在时，orthovanadate可以转变成pervanadate(过钒酸盐)。

Sodium orthovanadate可溶于水(100mg/ml)。为确保该为单体形式，可将溶液加热沸腾至半透明，并调节pH至10左右，待冷却后分装于塑料瓶中冷冻保存。如Sodium orthovanadate溶液颜色变橙黄色，为Sodium orthovanadate转化为devanadate，可调节pH至10并加热沸腾，即可重新转变为无色的单体钒酸盐。

CAS：13721-39-6
分子式：Na3VO4
分子量：183.91
纯度：＞99.9%

储存条件：室温。

·PPAR凝胶迁移突变探针(1.75μM)
编号：YT246
英文名称：PPAR Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
规格：60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的PPAR consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－PPAR的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。这里所指的PPAR包括PPARα、PPARβ和PPARγ。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。

PPAR consensus oligo的序列如下：
5＇-CAA AAC TAG GTC AAA GGT CA-3＇
3＇-GTT TTG ATC CAG TTT CCA GT-5＇

EMSA突变探针－PPAR中PPAR的公认的结合位点发生了突变，从而使PPAR无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和PPAR的结合的条带会被YZ；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和PPAR的结合的条带不会被YZ。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。


GRE荧光素酶报告基因质粒(糖皮质激素响应元件) 克隆与表达