名称:自诱导培养基(lac启动子) 克隆与表达
编号:BTN100825
品Pai:百奥莱博
英文名:Auto-induction Medium
规格:200mL
产品及特点:
本产品是本产品是在pET专用生长培养基的基础上开发而成的,它利用E.coli自身对培养基中不同碳源的调控利用机制,实现外源蛋白在细菌达到饱和生长期后的自动诱发。
本产品具有下列特点:
1.本产品自动诱导表达,不需要添加任何IPTG或相关诱导物,节约成本。
2.免去了密切监控菌液密度的过程,尤其适合大规模筛选。
3.极大将细菌的生长密度OD600从2左右提高20以上。
4.极大提高外源蛋白的表达量,可占细菌总蛋白的45%。
5.与各种细胞培养容器(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)兼容。
6.本产品即开即用,非常方便。
7.适用于T7 RNA聚合酶基因由lac启动子控制的任何表达系统,如pET系列。
8.不适用于lacZ或lacY突变的宿主菌。
运输及保存:常温运输及保存,有效期两年。
自备试剂:蒸馏水
使用方法:
一:培养基的配制
1.配制自诱导培养基:将1.25 mL溶液B全部加入到200 mL的溶液A中即得自诱导培养基。注意:必须严格无菌操作,否则自诱导培养基非常容易长细菌。
2.贴好标签待用。如果长期时间不用,可以冻存在-20℃。
二:培养基的使用
1.将构建好的质粒转化入细菌,如BL21(DE3),涂于自备的、含有1%葡萄糖的LB培养基中(需要加入适当浓度的KJ素),37℃培养过了夜。
2.挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度KJ素的液体LB培养基中,37℃培养直到菌液浑浊但不饱和(一般需要6-8小时)。
3.将所得菌液按千分之一的体积比例加入自诱导培养基中(如果自诱导培养基体积是100 mL,则加入100 uL菌液),同时加入适当的KJ素。注意:在自诱导培养基中,如果使用卡拉霉素,其终浓度比一般的培养基高,需要100 ug/mL。由于本方法所得菌液密度大,故需要大量氧气,因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底Z好是皱褶式的,这样摇晃中氧气供应更充分。
4.37℃培养过了夜,或37℃培养到菌液饱和时降低摇床的温度到所需温度(对温度诱导型启动子)。
5.收集菌液开始蛋白纯化步骤。
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更多有关自诱导培养基(lac启动子) 克隆与表达的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
·柱式粪便RNAOUT
编号:BTN101109
英文名称:Column Stool RNAOUT
规格:50次
产品简介:
由于粪便中有机质含量丰富,对RT-PCR等后续反应有极大的YZ作用,所以从粪便中提取高纯度的R N A 一直是十分棘手的问题。本产品是在我公司粪便RNAout基础上开发的柱式粪便RNA提取产品,它具有下列特点:
1.操作比非柱式法更加简单快速,处理一个样品只需要约十几分钟。
2.去污染效果好,RNA纯度更高,平均 OD260/280一般都在2.0左右。
3.得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
4.性价比高于进口的柱式粪便RNA提取产品。
5.试剂无毒无害, 环保。
运输及保存:
常温运输,4℃保存,有效期一年。
·Cy5-dCTP溶液
编号:BTN130996
英文名称:Cy5-dCTP Solution
规格:25μL
产品简介:
本产品是浓度为10 mM的 Cy5-dCTP的溶液。可在各种DNA聚合酶作用下掺入到新合成的DNA产物中。
运输及保存:
低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·生物素化蛋白G
编号:BTN131098
英文名称:Biotin-Protein G
规格:0.5mg
产品简介:
本产品为生物素标记的蛋白G, 可用于生物素化二抗的替代物。可以检测或定位位于细胞表面或组织中免疫球蛋白。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·Sulfolobus DNA聚合酶IV
编号:BTN131182
英文名称:Sulfolobus DNA Polymerase IV
规格:100U
产品简介:
Sulfolobus DNA聚合酶 IV 是一种热稳定的 Y 家族 DNA聚合酶,能在复制过程中绕过 DNA 损伤,因而能以多种损伤 DNA 为模板合成 DNA。
具体有下列特点:
1.以损伤 DNA 为模板合成 DNA
2.DNA 修复
反应缓冲液:
1X 反应缓冲液 [20 mM Tris-HCl(pH 8.8 @ 25℃),10 mM KCl,10 mM (NH4)2SO4,2mM MgSO4,0.1% Triton X-100]。
单位定义:
1单位指 55℃ 下,30分钟内,使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
Buffer 成分:
10 mM Tris-HCl,100 mM KCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,50% Glycerol,pH 7.4 @ 25℃
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自诱导培养基(lac启动子) 克隆与表达