北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖北京66KD蛋白Marker多少钱在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京66KD蛋白Marker多少钱
品Pai:百奥莱博
编号:RFT041
本产品包含一种已知分子量的标准蛋白质,分子量大小为66kD,可以用来判断SDS-PAGE未知蛋白的分子量。本品以干粉状态提供。
使用方法:
1、配制10mg/ml 66kD蛋白Marker母液:取10mg 粉末溶于1ml超纯水中。此溶液-20℃贮存。
2、按照下表配制Marker溶液
配制量 | 浓度 | 66KD母液(10mg/ml) | 超纯水 | 5×DualColor蛋白上样缓冲液 |
10μl | 0.2 μg/μl | 0.2μl | 7.8μl | 2μl |
50μl | 0.2 μg/μl | 1μl | 39μl | 10μl |
100μl | 0.2 μg/μl | 2μl | 78μl | 20μl |
3、取配制好的溶液彻底混匀后,95℃处理5分钟立即上样电泳,每次上样10μl。
4、电泳结束后,染色,观察结果。
储存条件:-20℃。
更多有关
北京66KD蛋白Marker多少钱的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
·植物基因组DNA提取试剂盒
编号:RFT038
英文名称:Plant genomic DNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,能提取多种植物细胞/组织中的基因组DNA。离心吸附柱可以GX、专一吸附DNA,可限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA*(代'片')段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
试剂盒组成:
组份 | RFT038(50次) | 贮存方式 |
缓冲液AP1 | 25 ml | 室温 |
缓冲液AP2 | 10 ml | 室温 |
缓冲液AP3(浓缩液) | 15 ml | 室温 |
漂洗液PW(浓缩液) | 15 ml | 室温 |
洗脱缓冲液EB | 15 ml | 室温 |
RNase A(10 mg/ml) | 300μl | -20℃ |
吸附柱CG(白色) | 50套 | 室温 |
过滤柱CF | 50套 | 室温 |
说明书 | 1份 | |
提取获得效率:
材料 | DNA得量(μg/100mg) |
大麦 | 8-12 |
玉米 | 15-20 |
番茄 | 4-6 |
油菜 | 2-4 |
菠菜 | 5-10 |
烟草 | 20-25 |
小麦 | 25-30 |
准备工作:
1、准备液氮;65℃水浴;无水乙醇;1.5ml灭菌离心管。
2、按照标签所示在缓冲液AP3和漂洗液PW中加入无水乙醇,混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3、每次使用前请检查缓冲液AP1,缓冲液AP2和缓冲液AP3是否有沉淀生成,如果出现沉淀,37℃温浴至沉淀溶解后再使用。
操作步骤:
如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、取适量植物新鲜组织500mg-1g加入液氮充分研磨,取约100mg粉末置于1.5ml离心管中,加入400μl 缓冲液AP1和6μl RNaseA (10mg/ml),漩涡震荡1分钟。
2、将离心管放在65℃水浴10分钟,水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
3、加入130μl 缓冲液AP2,颠倒混匀,冰浴5分钟。
4、12,000rpm离心5分钟。
注:此步骤离心去除去垢剂,蛋白以及多糖等杂质。
5、取上清(通常为400μl)转移到过滤柱CF中,12,000rpm 离心1分钟。
6、将滤出液转移到1.5 ml离心管中,加入1.5倍体积(例如400μl的上清液加600μl缓冲液AP3)缓冲液AP3(使用前请注意是否已经加入无水乙醇),立即颠倒混匀,简短离心以去除管盖内壁的水珠。
7、吸取步骤6中的混合液加入到吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中),12,000 rpm离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放回收集管中。
注:离心吸附柱的容积是700μl,如果一次不能完全上柱,可以分次上柱离心,保证全部溶液全部加到离心柱中。
8、向吸附柱CG中加入500μl漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。
9、重复步骤8。
10、可选步骤:如果离心柱的吸附膜上有颜色,向吸附柱CG中加入500μl无水乙醇,12,000 rpm离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。
11、将吸附柱CG放回废液收集管中,12,000 rpm离心2分钟。
注:此步骤非常重要,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
12、将吸附柱CG转入一个干净的1.5ml离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl经65℃水浴预热的洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟,12,000 rpm g离心2分钟。
注意:
a.洗脱缓冲液体积Z好不少于50μl,体积过小影响回收效率。
b.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。
13、DNA产物-20℃保存。
DNA浓度及纯度检测:
基因组DNA*(代'片')段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA*(代'片')段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0%琼脂糖凝胶,使用λ/HindIII判断基因组的大小,完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时, OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水洗脱,比值可能偏低,但并不表明DNA纯度不高。
储存条件:室温,有效期12个月。
北京66KD蛋白Marker多少钱