北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖高纯度质粒小量提取试剂盒(柱式)优惠促销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:高纯度质粒小量提取试剂盒(柱式)优惠促销
产地:国产|进口
编号:ALH078
规格:100次|200次
英文名:High purity plasmid small amount rapid extraction kit
本试剂盒适用于小量提取高纯度的质粒。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(50次):
平衡液—————————————10ml
RNaseA(10mg/ml)————————250μl
溶液P1—————————————25ml
溶液P2—————————————25ml
溶液P3—————————————35ml
去蛋白液PE———————————31.5ml
漂洗液WB————————————25ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)———————50套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.独特的去蛋白液配方,可以GX去除残留的核酸酶,即使是核酸酶含量丰富的菌株如JM系列、HB101也可以轻松去除。有效防止了质粒被核酸酶降解。
3.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯*(代'仿')等试剂,也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好, 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。一般高拷贝质粒,建议接种单菌落于1.5-4.5 ml加合适抗生素的LB培养基, 过夜培养14-16个小时,可提取出多达20μg的纯净质粒。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应适当加大菌体使用量,使用5-10 ml过夜培养物,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,其它步骤相同。
3. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
4. 质粒DNA确切分子大小, 必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
5. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在-
20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mMEDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:高纯度质粒小量提取试剂盒(柱式)|高纯度质粒提取试剂盒|高纯度质粒制备试剂盒|高纯度质粒小量提取制备试剂盒
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·小量全血基因组DNA快速提取试剂盒
编号:ALH108
英文名称:Whole blood genomic DNA extraction kit
规格:50次|200次
本试剂盒采用独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, YZ物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(200次):
缓冲液BB————————40ml
结合液CB————————60ml
YZ物去除液IR—————100ml
漂洗液WB————————50ml
洗脱缓冲液EB——————15ml×2
蛋白酶K————————80mg
吸附柱AC————————200个
收集管(2ml)—————200个
产品特点:
1.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。
3.多次柱漂洗确保高纯度,典型的产量200µl全血可提取出3-12µg,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达30 kb -50kb,可直接用于PCR、Southern-blot和各种酶切反应。
4.从十几个配方中优选出的红细胞裂解液配方,裂解快速完全,客户可根据需要选择购买。
5.典型的产量200µl全血可提取出3-12µg 基因组DNA。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 不同样品尤其疾病样品中白细胞数量差异可能非常大,因此产量的个体差异也可能非常大。
3. 需要自备异丙醇。
4. 开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。
5. 为了效果,Z好使用新鲜血液标本或者4℃存放少于3 天的标本,不要使用反复冻融超过3 次的标本,否则会严重降低产量。
6. 洗脱液EB 不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保批pH 大于7.5, pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存在-20℃。DNA 如果需要长期保存,可以用TE 缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA 可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
高纯度质粒小量提取试剂盒(柱式)优惠促销
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