北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)大量库存促销在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)大量库存促销
产地:国产|进口
英文名:Cells/Tissue Apoptosis DNA Ladder Extraction Kit
品Pai:百奥莱博
规格:20次|50次
编号:ALH158
本试剂盒选择性从组织和细胞中分离提取凋亡DNA ladder,通过选择性分离基因组DNA与凋亡DNA ladder,限度的减少了基因组DNA对凋亡DNA ladder的观察干扰,因此显著的提高了检测敏感度,反应可在微量离心管进行,2.5小时完成,快速方便;无需有机抽提,检测灵敏度极高,可从约2000个凋亡细胞中检测到DNA ladder。推荐起始细胞量为5~10×10^5 个,但投入的细胞量可在1×10^5~5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1~2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。本试剂盒也可用于从组织中提取凋亡DNA ladder。但与培养细胞相比,整体动物组织凋亡细胞出现的时间、部位、程度等规律性差往往造成难以准确取材,可能显著影响实验结果。但只要组织确实发生凋亡,有经验的用户也可以使用本试剂盒从组织提取凋亡DNA ladder
试剂盒组份(50次):
Extraction buffer ———10ml
10%SDS—————————1ml
Enzyme A————————1ml
Enzyme B————————1ml
Precipitant ——————7ml
为保持活性方便运输,Enzyme B 客户收到时为冻干粉,收到后加500μl 灭菌水(25 次)或者1ml 灭菌水(50次)溶解后-20℃保存。Enzyme A 和Enzyme B 为酶溶液,应该避免反复冻融降低活性,如果要分多次使用,Z好按照每次使用量分装后-20℃保存。
注意事项
1. 溴化乙锭染色过度将降低DNA条带检测灵敏度,可用水冲洗凝胶10~30分钟。如冲洗过头可再用溴化乙锭复染。可用更灵敏的DNA染色剂SYBR Green。也可进行丙烯酰胺DNA凝胶电泳和DNA银染。
2. 对细胞进行干预处理后,凋亡可能仅在某一时间点或某一干预强度下Z为明显。需要进行预试验确定干预时间或强度。此时也可用凋亡小体/hoeschst染色试剂盒(ALH160)快速染色凋亡小体观察。
3. 推荐起始细胞量为5~10×10^5 个,但投入的细胞量可在1×10^5~5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1~2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。六孔板的一个孔相当于一个35 mm培养皿长满后可得到1~10×10^5 个细胞,如果细胞凋亡发生率为10%,经过处理可得到约1~10×10^4个凋亡细胞,应该足以获得清晰的凋亡DNA ladder。反之如果不能从>3×10^6个细胞获得清晰的凋亡DNA ladder,表明其中凋亡细胞少于1%。此时增加细胞用量也难已奏效。
4. 从组织块提取凋亡DNA ladder。取10~20 mg组织块放入小玻璃匀浆器,加100~200μl Extraction buffer,上下手动匀浆15~20次。取出匀浆液,冰上5~10 min。振荡10秒。4500 rpm 10分钟收集上清液并转移到新1.5ml离心管,执行提取步骤3。另外一种方法是将30~50mg组织剪碎后在PBS里面匀浆,制成细胞悬液,离心收集细胞后接步骤2继续执行提取。
5. 采用高质量琼脂糖,使用宽度较小和厚度较窄的样品梳子,制作较薄的琼脂糖凝胶(厚度约2~4 mm);用较低的电压进行慢速电泳,将显著增加凋亡DNA条带检测灵敏度。电泳距离不要太长,否则将使小的凋亡DNA条带弥散而降低分辨率。
本品别名:细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)|细胞凋亡DNA Ladder分提试剂盒|组织凋亡DNA Ladder提取试剂盒
北京细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)大量库存促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·总RNA提取试剂(组织/细胞/液体样本)
编号:ALH003
英文名称:Total RNA extraction reagent From Tissue,Cell and Liquid Sample
规格:50ml|100ml
本试剂是直接从来源于人,动植物,酵母,细菌和病毒的液体样品中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯*(代'仿')后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。
无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。本试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。本试剂抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。
本试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带,两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。
注意事项:
1. 当本试剂用量少于2ml时建议使用清洁的一次性的聚丙材质试管。
2. 当本试剂用量较大时,可以使用玻璃试管(Corex)或聚丙材质试管,事先检验以确保该试管可以耐受加入本试剂和氯*(代'仿')后12,000×g的离心力。不可使用有裂缝或者破损的试管。
3. 离心前小心平衡试管。
4. 离心前玻璃管口必须盖上铝箔并用石蜡膜封口,聚丙烯管必须盖紧。
5. 从少量的组织(1~10mg)或细胞(102~104)中分离RNA 样品:调整样品体积到0.25ml,往组织或细胞中加入0.75ml 本试剂。待样品裂解后,加入氯*(代'仿')并进行步骤2 中的抽提操作。在用异丙醇沉淀RNA 之前,加入5~10μg 无RNA 酶的glycogen 作为水样层的载体。为降低其黏度在加入氯*(代'仿')前用26 号注射器抽吸两次以切断基因组DNA。Glycogen 会留在水样层中并和RNA 共析出。在浓缩到4mg/ml之前它不会YZ逆转录反应链的合成也不会YZPCR。
6. 在匀浆化后和加入氯*(代'仿')之前,样品可以在–60~–70℃ 保存至少一个月。RNA 沉淀(步骤4,RNA 漂洗)放置于75%的乙醇在2~8℃ 至少可以保存一周,在–5~–20℃下至少可保存一年。
7. 台式离心机能达到2,600×g 的离心力的,如果将离心时间延长到30~60 分钟可以满足步骤2 和步骤3 中的操作。
储存条件:4℃,有效期12个月。
北京细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)大量库存促销
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