北京百奥莱博公司提供的沙丁胺醇ELISA检测试剂盒厂家稳定性好,灵敏度高,是高品质的单克隆抗体。欢迎新老客户踊跃咨询购买
名称:沙丁胺醇ELISA检测试剂盒厂家
品Pai:百奥莱博
编号:DL022
产地:国产|进口
英文名:Salbutamol Elisa Kit
规格:96T
一、原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样本中沙丁胺醇的残留量。
二、适用范围
定量检测动物组织、尿样和饲料样品中沙丁胺醇的残留。
三、试剂盒特点及技术指标
* 检 测 时 间 : 50 min
试剂盒灵敏度: 0.2 ppb(µg/kg)
* 试剂盒检测纯阴性样本的背景值<0.1 ppb
* 尿样直接点板,假阳性率≤1%
试剂盒检测样本的灵敏度和准确度:
样本 检测下限 回收率
动物组织 0.6 ppb 70 %-120 %
尿样 0.2 ppb 70 %-120 %
饲料 20 ppb 70 %-120 %
试剂盒特异性:
药物名称 交叉反应率(%)
沙丁胺醇 100 %
多巴酚丁胺 < 1 %
克仑特罗 < 1 %
四、所需材料
仪器:微孔板酶标仪450 nm/630 nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装置、均质器、振荡器、离心机、水浴锅、刻度移液管(10 mL)、天平(感量0.01 g)、离心管(5 mL, 50 mL)
微量移液器:单道 1 µL~10 µL、10 µL~100 µL
多道 50 µL~300 µL
试剂:乙腈、异丙醇、乙酸乙酯、正己烷、氢氧化钠、浓盐酸、去离子水。
五、 试剂盒组成
序号 组成部分 96T装量
1 沙丁胺醇酶标板 12×8孔
2 沙丁胺醇标准品工作浓度*6 6×1 mL
3 沙丁胺醇高浓度标准品1 ppm 1 mL
4 沙丁胺醇酶标物 13 mL
5 沙丁胺醇抗体 7 mL
6 底物液A液 7 mL
7 底物液B液 7 mL
8 终 止 液 7 mL
9 10×浓缩洗涤液 40 mL
10 2×沙丁胺醇样品稀释液 45 mL
*注:6个标准品浓度为:0 ppb, 0.2 ppb, 0.6 ppb,
1.8 ppb, 5.4 ppb, 16.2 ppb,直接使用。
六、 酶标免疫测定程序
① 将所需试剂从冷藏环境中取出,待其完全回 升至室温(20~25℃)后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
② 按标准品和样品双孔平行的数量使用微孔。
③ 加标准品/样品、抗体:加标准品/样品50 µL
到对应的微孔中,再加入沙丁胺醇抗体50 µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应20 min。
④ 洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,
加入洗涤工作液250 µL/孔,每次静置20 s,甩去孔内液体,重复洗涤3次,一次用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
⑤ 加酶标物:加入沙丁胺醇酶标物100 µL /孔,
轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光反应20 min,甩干孔内液体,重复洗板3次,一次用吸水纸拍干。
⑥ 显色:加入底物液A液50 µL/孔,再加底物
液B液50 µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应10 min。
⑦ 测定:加入终止液50 µL/孔,用酶标仪立即 测定450 nm处的吸光度值(建议用双波长450/630 nm)检测。
七、 结果判定
以标准品百分吸光率为纵坐标,以沙丁胺醇标准品浓度(ppb)的半对数为横坐标,绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中沙丁胺醇实际浓度。(详见试剂盒专业分析软件,以便进行大量样本的分析计算。)
八、 注意事项
① 洗板拍干后应立即进行下一步操作。
② 反应终止液为2 M硫酸,避免接触皮肤。
③ 不使用过了有效期的试剂盒,不交换使用不同批号的试剂。
④ 0标准的吸光度(450/630 nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。
⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色时间为10~15 min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到20 min,反之则减短反应时间。
九、贮藏条件及保存期
贮藏条件: 2~8℃
保 质 期: 12个月
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·新城疫血凝YZ试验抗原、阳性血清
编号:DL032
规格:2ml×2
【兽药名称】
通用名 新城疫血凝YZ试验抗原、阳性血清
商品名 无
英文名称 NDV Antigen,Positive Sera for Haemagglutination Inhibition Test
汉语拼音 Xinchengyi Xueningyizhi Shiyan Kangyuan Yangxingxueqing
【产品内容】
主要成分 数 量
新城疫血凝YZ试验抗原 2ml×1
阳性血清 2ml×1
使用说明书 1份
【成分性状】
抗原含灭活的新城疫病毒,血凝效价≥1:512;阳性血清为新城疫高免的SPF血清,HI效价≥1:512。
【作用与用途】
用于血凝YZ试验检测新城疫抗体(血清、卵黄)。
【用法与判定】
1 血凝(HA)试验操作方法
1.1 在96孔微量板上,用加液器每孔加入PBS缓冲液25μl。
1.2 取25μl抗原,从第1孔起,依次作2倍系列稀释至第12孔,混合,弃去25μl。
1.3 每孔加入25μl PBS缓冲液。
1.4 每孔加入25μl 1%鸡红细胞悬液,每块板上设稀释液和红细胞悬液对照孔。
1.5 将微量板置振荡器上振荡30秒,置2~8℃作用45分钟,判定结果。
1.6 结果判定 将微量板倾斜45度,对照孔的红细胞应完全沉淀到孔底ZX,呈泪珠样流淌;阳性孔的红细胞则均匀分布于孔底或呈锯齿样凝集,使红细胞完全凝集的稀释倍数为该抗原的HA效价。
1.7 工作抗原的配制 如果抗原凝集价测定结果为1:256(举例),则4个HA单位为1:64(256÷4=64),这时可将HI抗原用PBS缓冲液稀释64倍,即成4 HA单位的工作抗原液。
2 血凝YZ(HI)操作方法
2.1 在96孔微量板上,每行从第2孔开始,每孔加入25μl PBS缓冲液,直至第12孔。
2.2 分别在第1、2、12孔中加入处理过的卵黄上清或待检血清25μl。
2.3 用加样器从第2孔起作2倍系列稀释,直至第10孔(血清稀释倍数从第1孔的1:4、第2孔的1:8……至第10孔的1:2048),弃去25μl。
2.4 向第1~11孔中加入25μl 4 HA单位的抗原,在微量振荡器上振荡30秒,室温下作用30分钟。
2.5 每孔加入25μl红细胞悬液,振荡30秒,放2~8℃下反应30~45分钟,判定结果。
2.6 判定 判定时将微量板倾斜45度,只有当抗原对照孔(第11孔)中红细胞完全凝集,血清对照孔(第12孔)中的红细胞完全沉淀时,当阴性血清HI抗体效价不高于1:8,阳性血清HI抗体效价与已知效价相比误差不高于1个滴度时,试验方为成立。若红细胞沉淀呈泪珠样流淌,判为HI阳性;若红细胞在孔底均匀分布或呈锯齿状凝集,判为HI阴性。以完全YZ红细胞凝集的稀释倍数作为待检样品的HI抗体效价。
【注意事项】
(1)对HA和HI试验结果影响因素很多,应严格按照试验程序进行操作,尤其应注意试验温度和作用时间。
(2)准确配制1%鸡红细胞悬液,使用时应充分摇匀。
(3)准确配制4 HA 单位的工作抗原,使用前需进行滴定,配制好的工作抗原应在2小时内用完。
(4)抗原及阳性血清按规定在-20℃以下冷冻保存,使用时融化后摇匀;抗原应根据所测样品的数量用多少稀释多少,未用完的抗原仍在-20℃以下冷冻保存,该抗原可反复冻融。
(5)本抗原使用应按实验室生物安全有关规定进行操作,用完的器皿、吸头等应彻底消毒。
【贮藏与有效期】-20℃保存,有效期为12个月
沙丁胺醇ELISA检测试剂盒厂家
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