北京百奥莱博专业生产供应低分子量蛋白Marker(14.4-116KD)折扣价,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:低分子量蛋白Marker(14.4-116KD)折扣价
品Pai:百奥莱博
规格:20次
编号:RFT048
产地:国产|进口
● 储存条件:-20℃保存。
● 产品简介:
本产品包含7种已知分子量的标准蛋白质组成,分子量范围为14.4kD-116kD,可以用来判断 SDS-PAGE未知蛋白的分子量。本成品由于含有SDS,不适于非变性胶蛋白电泳(Native PAGE)。
● 使用说明:a 次收到该产品,室温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底,根据需
要适量分装成小管,-20℃贮存,每次取一小管使用。
b -20℃取一管样品,彻底融化,95℃处理5分钟后立即上样。
注:1 一次热处理后,未用尽样品-20℃保存;下次使用时只要室温完全融化混匀后即可上样,可以不用再加热处理。
然而,如出现带型缺失现象或样品聚集在分离胶上沿,可在Marker中加入终浓度为50mM的DTT,95℃处理5分钟后再上样。
2 上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5μl,其他规格梳子请适当调整上样量。
c 电泳结束后,染色,观察结果。
注:使用银染时,由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法,可以适当降低Marker上样量。
除低分子量蛋白Marker(14.4-116KD)折扣价外,我公司正在打折促销以下产品:
·10×RealBlot快速转膜液
编号:RFT081
规格:500ml
● 产品简介:
快速转膜液使用独特配方,能GX快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF或硝纤膜)上。使用湿转法(Tank blot)或半干转法(Semi-dry blot)方法,能在15-35分钟内完成转膜过程。
快速和环保:快速转膜液不使用甲醇,减轻了对实验者和环境的伤害。
兼容性好:快速转膜液能兼容Laemmli胶,预制胶,Bis-Tris胶等多种凝胶。
转移效率高:快速转膜液对分子量跨度较大的蛋白也有很好的转移效率,有效解决了大小蛋白不能在同一张膜上同时转移的问题。
● 贮存: 18-26℃常温贮存,有效期一年。
● 使用说明:转膜前的准备:5-6张裁好的滤纸;裁好的转印膜;足够的1×快速转移buffer
一 湿转法(Tank blot):1 按照下表配制1×快速转膜液
1×快速转膜液配制量
100 ml 500 ml 1000 ml
10×快速转膜液 10 ml 50 ml 100 ml
无水乙醇 20 ml 100 ml 200 ml
超纯水 70 ml 350 ml 700 ml
2 将滤纸和海绵浸泡在1×快速转膜液中,完全浸湿。
3 将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。
注意:水中漂洗时间一定不能超过2分钟,否则分子量较大的蛋白不能完全转移。
4 按照以下顺序做好转印三明治结构:负极(阴极)
一块海绵
2mm滤纸
凝胶
转印膜
1mm滤纸
一块海绵(根据三明治的厚度选择是否使用)
正极(阳极)
注意: ① 要彻底清除三明治结构中的气泡,适当补加1×快速转膜液保持三明治结构湿润。
② PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。
③ 三明治结构的制作不能太紧,也不能太松。太紧和太松都会影响转印效果。如果太紧的话,可以去除阳极一侧的海绵或滤纸。
5 将三明治结构放于转移槽中。
注:转移槽中可以不用1×快速转膜液,可以用1×TGS(Tris-Glycine-SDS)电泳缓冲液取代。三明治结构中的快速转膜液足够保证转膜的完成。
二 半干转(Semi-dry blot):1 按照下表配制1×快速转膜液:1×快速转膜液配制量
100 ml 500 ml 1000 ml
10×快速转膜液 10 ml 50 ml 100 ml
无水乙醇 20 ml 100 ml 200 ml
超纯水 70 ml 350 ml 700 ml
2 将滤纸浸泡在1×快速转膜液中,完全浸湿。
3 将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。
注意:水中漂洗时间一定不能超过2分钟,否则分子量较大的蛋白不能完全转移。
4 按照以下顺序做好转印三明治结构:负极(阴极)
下层滤纸
凝胶
转印膜
上层滤纸
正极(阳极)
半干转时,滤纸、胶、膜之间的大小,一般是下层滤纸>=膜>=胶>=上层滤纸。上下两层的滤纸一定不能接触;滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡。接触的滤纸和气泡会造成短路。
注意:PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。
低分子量蛋白Marker(14.4-116KD)折扣价
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