PP2501型碱性磷酸酶底物显色试剂盒(BCIP/NBT)促销

名称：PP2501型碱性磷酸酶底物显色试剂盒(BCIP/NBT)促销
规格：100ml
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：PP2501
产品介绍：
BCIP/NBT 是碱性磷酸酶（ Alkaline phosphatase ,AP）的显色底物，经免疫反应固定的碱性磷酸酸酶可催化BCIP/NBT 产生化学呈色反应，在蛋白转印膜阳性蛋白条带处原位形成蓝紫色的化合物沉淀。
操作方法：
⒈ 按常规操作，将蛋白样品进行SDS-PAGE电泳，转膜（硝酸纤维素膜和PVDF 膜均可使用）。封闭30~120 min，一抗孵育1 小时或过了夜；漂洗3~5 次，碱性磷酸酶标记二抗孵育30~120 min，漂洗3~5 次。如上述步骤采用磷酸缓冲液，需换用Tris 缓冲液漂洗3~5 次以完全去除磷酸成分对于APYZ作用。
⒉ 取1ml AP reaction Buffer 中加10μl NBT溶液和10μl BCIP 溶液，混匀。注意：根据膜的大小，AP Buffer、NBT、BCIP 的量等比例扩大。
⒊ 把经洗涤的PVDF/NC 膜浸入显色底物混合物中，于室温平缓摇动进行温育。
⒋ 细心观察反应过程，待蛋白膜上条带呈色明显，而无明显背景时(一般约5-15 分钟)，把膜浸入水中漂洗停止反应。注意：若信号太弱可增加反应时间。
⒌ 拍摄膜照片或直接保存膜留作试验纪录。

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