微球菌核酸酶优惠价

名称：微球菌核酸酶优惠价
品Pai：百奥莱博
英文名：Micrococcal Nuclease
产地：国产|进口
编号：BTN120412
规格：5000U
产品简介:
Micrococcal Nuclease(微球菌核酸酶)是一种内切核酸酶，作用于单链及双链核酸，生成3′磷酸末端。对单链核酸的作用较好，能较好地分解DNA或RNA的富含AT或AU区域。本酶不需要Mg2+，其催化作用需要Ca2+的存在。 本酶主要用作：
1. 细胞粗抽提液中核酸的水解。
2. 为制备核小体(Nucleosome)时消化分解染色质(Chromatin)。
纯度:
1. 50 U的本酶和1μg的λDNA在Mg 存在下，37℃反应10分钟，DNA的电泳谱带不发生变化。
2. SDS-PAGE: ＞95%。
使用及效果:
DNA的片段化
1. 在微量离心管中配制下列反应液。
DNA 100μg
10×Buffer 5 μl
Micrococcal Nuclease 2U
dH2O up to 50 μl
2. 37℃反应数分钟(通过预实验确定具体反应时间)。
3. 加入5 μl的 200 mM EGTA(或 EDTA)停止反应。
4. 加入5 μl(1/10量)的 3 M NaOAC(pH5.2)。
5. 加入125 μl( 2.5倍量)的冷无水乙醇，-20℃放置30～60分钟。
6. 离心回收沉淀，用70％的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。
备注:
本酶的活性严格依赖于Ca2+的存在，用EDTA或EGTA可以终止反应。微球菌核酸酶来源于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus ) ，是一种非特异性的核酸内切酶和核酸外切酶。该酶从重组 E. coli 菌株纯化得到，可消化双链、单链、环化以及线性的核酸。在 pH 7.0-10.0 的范围内，微球菌核酸酶均有活性，无论对于 DNA 底物还是 RNA 底物，其Z适 pH 值均为 9.2。微球菌核酸酶偏向于切割富含腺苷酸、脱氧腺苷酸或胸腺苷酸的底物。酶切 DNA和RNA底物产生带有 3＇ 磷酸的单核苷酸和二核苷酸。
活性单位定义:
以热变性小牛胸腺DNA作底物，在37℃、pH8.0的条件下，30分钟生成1OD260的酸可溶性物质所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。
Buffer成分:
储存Buffer:Tris-HCl(pH8.0)50mM，NaCl50mM，DTT1mM，Glycerol50%。
反应Buffer，10×：Tris-HCl(pH8.0)200mM，NaCl50mM，CaCl225mM。
运输及保存:
低温运输，-20℃保存，有效期一年。

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·一站式真菌mRNAOUT
编号：BTN81103
英文名称：One-Stop Fungal mRNA Isolation Kit
规格：25次
产品简介:
本产品专门用于从常见的各种真菌中快速提取总RNA,然后再用(dT)纤维素分离其中的mRNA,提取过的真菌包括Candida albican、Saccharomyces cerevisiae,Schizosaccharomyces pombe 和Pichia pastoris、Aspergillus flavus 等。
本产品的特点是:
1.一站式操作,本试剂盒足够50次微量真菌总RNA提取,25次从总RNA开始的微量mRNA提取。
2.得到的mRNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarrayhybridization、cDNA合成等。
3.操作比柱式法mRNA纯化法更简单,不需要过柱,免去很多繁琐步骤。
4.整个过程只需要约60分钟。
使用及效果
1.用真菌RNAOUT的方法提取真菌总RNA,将两管收集在一起,共得到100 μL总RNA(详见真菌RNAOUT的使用手册)。
2.从总RNA中纯化mRNA:将0.5 mL 溶液A(结合液)加入到一管装有Oligo(dT)纤维素的离心管中,放置5分钟后离心吸弃上清后待用。将制备的总RNA100 μL加热到65℃ 5分钟后加入等体积的溶液A,转移到装有Oligo(dT)纤维素的离
心管中,颠倒混匀数次,离心后将上清转移到一个离心管中。用0.5 mL溶液A,混匀后4℃ 200g 离心5分钟,小心弃上清。重复上步洗3-5次,用DEPC水洗脱并收集mRNA。
3.用微量核酸沉淀剂沉淀mRNA(详见微量核酸沉淀剂使用手册)。
注:所得mRNA只占总RNA的5%左右,很微量很珍贵,一般不宜电泳检测。
运输及保存:
常温运输,4℃保存,Oligo(dT)纤维素低温运输,-20℃保存,有效期一年。

·BAL 31核酸酶
编号：BTN120409
英文名称：BAL 31 Nuclease
规格：50U
产品简介:
BAL 31 Nuclease(BAL 31核酸酶)是海洋性细菌A.espejiana BAL 31在菌体外产生的酶。能以内切方式特异性地降解单链DNA，没有单链时也作用于双链DNA，表现出从DNA两端同时降解的5′→3′及3′→5′的外切酶活性(Trimming活性)，产物为5′-P单核苷酸。 该酶同时还是高度特异性的单链核酸内切酶，在切刻、缺口、双链 DNA单链区和双链 RNA 的单链区进行切割。
本产品具有下列特点：
1. 从两端逐步对双链 DNA 进行切割。
2. EGTA 使本酶失活。
3. 限制性酶切图谱的构建。
备注:
1. 单链Endonuclease活性在反应温度从30℃降到20℃时，大约下降到1/10左右，而双链Exonuclease活性大约残留1/3左右。
2. Endonuclease活性不受盐浓度影响，但Exonuclease则是盐度越高活性低。
3. Trimming 活性的Z适盐浓度在200 mM NaCl左右，若低于此浓度有时表现Nicking活性。
4. 分解活性对碱基的依存性较高，由于GC rich领域不易被分解，在酶切时，需选择末端限制酶位点。
5. 反应中因各种酶活性的反应分配(Distributive)关系，对酶浓度有较大的依存，所以对稀释不表现线性关系。因此当酶反应速度过时，应降低反应温度。
6. 本酶需要Ca2+的存在，通过使用螯合剂可使其不可逆失活。在NaCl浓度为1 M左右时，该酶对于单链DNA表现出活性。相反对于双链DNA，其活性则随着盐浓度的增加而降低。当盐浓度在100 mM以下时，有时会发生随机分解。因此，建议在盐浓度200～600 mM的范围内进行反应。
7. 通过本酶产生的末端的平滑率只有10%左右，为了提高连接效率，建议通过T4DNA Polymerase进行修复。
活性单位定义:
以热变性小牛胸腺DNA为底物，在 30℃、pH8.0的条件下，1分钟内生成1μg 酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
Buffer成分:
储存Buffer:
Tris-HCl(pH8.0)20 mM，
NaCl 100mM，
CaCl2 5 mM，
MgCl2 5mM，
EDTA 1 mM，
Glycerol50%
反应Buffer，2×:
Tris-HCl(pH8.0)40 mM ，
NaCl 1,200 mM，
CaCl2 24 mM，
MgCl2 24 mM，
EDTA 2 mM。
运输及保存:
低温运输，-20℃保存，有效期一年。


微球菌核酸酶优惠价