克必隆G载体(零背景克隆载体)快速从不同材料中获得高质量的基因组DNA或总RNA ,重复性好,离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小。2. 节省时间、简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。3. 可配合RNase free DNase直接在离心吸附柱子RA上面消化DNA。
克必隆G载体(零背景克隆载体) 数量:大量
保质期:两年
保存条件:-20℃保存
规格:2ug
克必隆G载体(零背景克隆载体)添加DMSO或者使用修饰化的碱基以及使用LA-Taq来扩增PCR这些在我也都做过,不过都正如你所说,都是直接扩增基因组或cDNA.
而高GC含量影响反转录也是肯定的,因为高GC肯定容易形成复杂的二级结构,这些可以参见《分子克隆》。“我至今没有听说高GC含量会不利于逆转录,有一个证据就是在FMDV基因组RNA中有长达500bp的GC tail,克必隆G载体(零背景克隆载体)这个病毒的全基因组一样被测序出来”,但这并不能说明逆转录没有遇到麻烦,人家不会告诉你经过怎样的过程才测出来的。比如,对高GC含量的模板测序会比较困难吧,可是你到网上搜一搜,高GC含量的区域多的是,不然的话我也不无法预测我的基因5‘端有一个高GC区了是吗?我们不能因此就推出GC含量高不影响测序吧?我自己的例子也证明了高GC含量影响逆转录的,因为无论是筛库还是RACE,都是只能拿到此区域的相邻3’区,而可以肯定的是,所得到的一定不是全长,可见肯定是由于逆转录不过去。在搜一下文献,可以得出我的结论的。所以我现在的困难在于反转录,而不是PCR。
克必隆G载体(零背景克隆载体)首先检查一下你的基因片断大小以及回收量(应该不是很大,所以回收的量很可能太少),太小的片断不容易连,如果是这样建议使用好的感受态,或增大回收的量。其次看一下你回收时所用的紫外,波长是否小于314nm,如果是建议使用314以上的,并且操作时间尽量减短。第三,建议将回收产物普通Taq加A,不需回收,再连一次。,检查一下感受态。还有,如果T-easy存放时间过长,建议使用新的。
难度不出很大。克必隆G载体(零背景克隆载体)如果诱变的位点在基因中间,你可以用一个突变引物先引入突变;然后用这个突变体做一侧的引物(大引物),与另一个引物一起,以野生型基因为模板扩增。我们用这种方法做出来多个突变体。
ZI340-1兔抗AvidinIgG-FITC0.5mlZOMANBIO
ZI341-1人白蛋白-FITC0.5mlZOMANBIO
ZI342-1Avidin-FITC(订货)0.5mlZOMANBIO
ZI343-1兔抗生物素-FITC0.5mlZOMANBIO
酶标记抗体
ZI401-1羊抗人IgA(α链特异)0.1mlZOMANBIO
ZI402-1羊抗人IgM(μ链特异)0.1mlZOMANBIO
ZI403-1羊抗人C30.1mlZOMANBIO
ZI404-1羊抗人纤维蛋白原0.1mlZOMANBIO
ZI405-1羊抗人白蛋白0.1mlZOMANBIO
ZI406-1羊抗人IgG、A、M0.1mlZOMANBIO
ZI407-1兔抗人IgG-F(ab)20.1mlZOMANBIO
ZI408-1兔抗猴IgG0.1mlZOMANBIO
ZI409-1兔抗豚鼠IgG0.1mlZOMANBIO
ZI410-1兔抗狗IgG0.1mlZOMANBIO