慢病毒(Lent virus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展而来的基因载体,该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,达到持久性表达的效果。可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,效果非常理想,具有广阔的应用前景。
慢病毒包装系统由慢病毒表达载体和慢病毒包装载体组成。慢病毒表达载体,即通常所说的穿梭载体,包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒则可提供所有的转录并包装RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞(293包装细胞),在细胞中进行病毒包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染。
百恩维的慢病毒包装系统是四质粒包装系统。百恩维技术团队已进行过多种目的基因的慢病毒包装,具有丰富的科研经验。现有客户包括研究所、医院、生物公司等。
慢病毒包装技术服务包含内容:
(一)慢病毒载体的构建:
将目的基因克隆构建到慢病毒载体,根据不同的研究需求,有用于基因过表达的慢病毒载体、用于RNAi的慢病毒载体、用于启动子活性研究的慢病毒载体等;
(二) 慢病毒包装:
1、得到的慢病毒载体,与辅助载体一起转染293T细胞进行包装;
2、将包装好的病毒超速离心收集;
3、将浓缩病毒进行滴定,滴定结果单位为TU/ml。
(三)慢病毒鉴定与质量控制:
1、测序鉴定
2、根据特定引物作RT-PCR鉴定
3、蛋白表达鉴定(根据客户要求)
百恩维生物