研究哺乳动物细胞中GX瞬时过表达目的基因,腺病毒系统是具备实现这样目的可靠平台。当研究的靶细胞用常规的脂质体转染无法达到预期的效果,不能满足后续实验要求是,腺病毒将会成为研究实验的。病毒可以侵染如原代或非分裂细胞,利用病毒递送外源基因至靶细胞内是非常有效的选择。我们通常采用293腺病毒包装细胞系进行包装。该细胞内含有腺病毒包装所必需的E1基因序列,是专为生产腺病毒和进行滴度测定而建立的),用于高滴度的复制缺陷型(E1和E3缺失)腺病毒的生产,可以不断扩增,能够满足有后续动物实验注射用病毒量。
【特 点】
♦ 技术平台:腺病毒表达系统。
♦ 腺病毒载体感染宿主的范围比较广,几乎可以感染所有类型的细胞制备容易,操作简单。
♦ 病毒滴度高,产生病毒经过浓缩后可以达到1012 PFU/mL,能有效的进行增殖,并适合进行高通量应用。
♦ 为提供克隆空间,缺失了E1和E3早期区,生物安全性高,不整合到染色体中,无插入致突变性。
【服务流程】
1. 腺病毒表达载体构建(过表达、shRNA i),消化纯化后质粒。
2. 腺病毒的制备,表达载体脂质体转染到293A包装细胞。然后收获细胞获取病毒粗提液。
3. 病毒粗提液感染293A细胞,以扩增病毒,检测病毒滴度。
4. 用病毒上感染靶细胞。
5. 收集细胞做相关WB检测。
【客户提供】
♦ 含有目标基因的质粒(提供测序结果)或所要表达的目的基因的名称,由我们从J基因库调取。
♦ 病毒滴度及总量,是否需要对病毒纯化(费用另计)。
♦ 检测用外源目的基因相应的抗
【我们提供】
♦ 重组后的携带目的基因的腺病毒载体质粒及菌液,病毒滴度结果、完整实验报告。
♦ 腺病毒储存液1ml ,规格: 1X10^11 PFU/ML 及阴性对照。
【质量保证】
♦ 至少1ml 活性滴度为1X 10^10-11 PFU/ml的病毒原液.