腺相关病毒包装技术服务
腺相关病毒属微小病毒( parvovirus)家族的成员,为无包膜的单链线状DNA病毒。AAV的基因组约4700bp,包括上下游两个开放读码框架(ORF),位于分别由145个核苷酸组成的2个反向末端重复序列(ITR)之间。
腺相关病毒具有安全性高、免疫原性低、能介导基因在动物体内长期稳定表达,因而被认为是Z有潜力成为基因ZL工具的载体而在国内外研究中广泛应用。
百恩维生物在包装腺相关病毒时有10种不同的AAV血清型以及单双链AAV可供客户选择,建议客户针对不同组织器官选择相应血清型的AAV病毒,见下表。腺相关病毒可用于基因的过表达(3kb以下)、shRNA(单条或者多条串联)、miRNA(pre-miRNA或者pri-miRNA)、可诱导表达。
10种不同血清型对各组织器官细胞的亲和性 |
血清型 | 组织亲和性 |
AAV1 | 肌肉,心脏,骨骼肌(包括心肌),神经组织 |
AAV2 | 神经,肌肉,肝脏,脑组织,眼, |
AAV3 | 肌肉,肝脏,肺,眼 |
AAV4 | 神经,肌肉,眼,脑 |
AAV5 | 肺,眼,神经,关节滑膜, |
AAV6 | 肺,心脏 |
AAV7 | 肌肉,肝脏 |
AAV8 | 肝脏,眼,神经,肌肉 |
AAV9 | 心脏,肌肉,肺(肺泡),肝脏,神经 |
DJ | 视网膜,肝脏,肺,肾脏 |
百恩维生物腺相关病毒包装技术服务包含内容:
1. 腺相关病毒载体的构建:将目的基因克隆构建到腺病毒载体,根据不同的研究需求,有用于基因过表达的腺相关病毒载体、用于RNAi的腺相关病毒载体等;
2. 腺相关病毒病毒包装:腺相关病毒载体与辅助载体(客户选定的不同血清型)一起转染293AAV细胞进行包装,将包装好的病毒纯化和浓缩;
3. 腺相关病毒鉴定与质量控制:载体测序鉴定、QPCR测定滴度、感染活性测定
百恩维生物Z常用的腺相关病毒载体:
腺相关病毒基因过表达载体 腺相关病毒基因干扰载体
腺相关病毒包装效果图,仅供参考:
红色荧光对照 含目的基因的红色荧光的腺相关病毒
百恩维所用的红色荧光蛋白是tdTomato,tdTomato比EGFP亮6倍。
绿色荧光对照 含目的基因的绿色荧光的腺相关病毒
百恩维所用的绿色荧光蛋白是ZsGreen,ZsGreen比EGFP亮2.5倍
相关技术服务:
腺病毒包装
慢病毒包装
非整合型慢病毒包装
杆状病毒包装
稳转细胞株构建