植物脱镁叶绿素a氧化酶（PAO）ELISA试剂盒

品Pai：ZCIBIO

产品名称： 植物脱镁叶绿素a氧化酶(PAO)ELISA试剂盒

产品规格：48T（次）/96T（次）

实验样本：血清、血浆、细胞上清液、组织、植物的根茎叶等其他相关生物样本

应用领域：仅供科研实验，不得用于临床诊断，使用前请认真阅读说明书

保存条件：2~8℃，有效期6个月。

我没有足量的稀释液去稀释所有的样品，怎么办？
◆ 试剂盒内提供说明书中所指定的足量的稀释液。能保证所有的标准品和样品检测两次。
◆ 如果没有推荐的稀释度，或者需要大量稀释，请在实验前计算出所需的稀释液总量，然后联
系技术服务部门获取额外的稀释液。
我能否使用试剂盒内非推荐的样品类型？
◆ 试剂盒内说明书中所指定的样品类型是经过验证可行的。其它未推荐的样品类型是没有经过
任何检测的。
我使用对照的检测结果都在范围外，为什么？
◆ 如果使用对照，其浓度应该是在某一特定范围内。如果对照值在范围外，则是无效测定。
◆ 确定对照具有重复性。

标本的采集与保存

1.植物标本的采集及保存 

（1）称取0.1g（误差±3%以内）新鲜植物组织样本，在液氮中充分研磨；

（2）加入1ml的提取液（80%甲醇）, 置于-20度过夜；

（3）于4度，8000rpm，离心20分钟，取上清；

（4）上清液过C-18固相萃取柱。具体步骤是： 80%甲醇（1ml）平衡柱→上样→收集样品→移开样品后用甲醇（5ml）洗柱→乙（5ml）洗柱→甲醇（5ml）洗柱→循环。过柱后的样本真空干燥或氮气吹干，保存备用；

（5） 上样前加入pH7.4 PBS缓冲液（1ml定容）。混匀后室温放置30分钟，然后4度离心（8000rpm，15分钟），取上清并暂时保存于4度待用。

3.组织匀浆：

用预冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的 PBS（一般按 1:9 的重量体积比，比如 1g 的组织样品对应 9mL 的 PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在 PBS 中加入蛋白酶YZ剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于 5000×g 离心 5~10 分钟，取上清检测。

4.细胞培养上清或其他生物标本：

请 1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融（如检测细胞内蛋白，则对需要细胞进行破碎处理）。

注意:以上标本均需密封保存，4℃保存应小于一周，-20℃ 不应超过1个月，-80℃保存可放置更久。

标本使用前应缓慢均衡至室温，不应加热使之溶解。

标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

标本说明

• 本公司只对试剂盒本身负责，不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责，请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量，预留充足的样本。

• 实验前应预测标本含量，如果标本浓度过高，应对标本进行稀释，使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
• 若所检样本不包含在说明书所列样本之中，建议进行预实验验证其有效性，并注意留存样本。
• 使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。

• 若样本为细胞培养上清，因该类样本干扰因素较多，如：细胞状态、细胞数量、采样时间等，所以可能存在检测不出的情况。
• 某些天然蛋白或重组蛋白，包括原核及真核重组蛋白，可能因为产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配，而不被检测出。

7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

 此产品提供免费代测服务，上海茁彩生物科技有限公司专注酶联免疫，专注ELISA，期待您的来电！

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