自噬介绍
自噬(Autophagy)是细胞内物质降解的代谢过程。细胞接受自噬诱导信号后,在胞浆被降解物的周围形成一个双层或多层的扁平杯状分隔膜,分隔膜逐渐延伸、弯曲,将要被降解的胞浆成分完全包绕隔离开形成自噬体( autophagosome) ,自噬体形成后通过细胞骨架微管系统将其包裹物运至溶酶体内融合形成自噬溶酶体(autolysosome),将胞浆成分降解、实现再循环,以维持细胞自身的稳定(如图)。

图1. 自噬的发生过程
产品介绍
LC3是自噬标志物。自噬发生初期,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为膜型LC3(即LC3-II),并引导Stub-RFP-Sens-GFP聚集在自噬体上,荧光显微镜下可观察到红色/绿色共定位的点状聚集。自噬发生后期,溶酶体与自噬体融合形成自噬溶酶体,环境pH值发改变。而Sens-GFP绿色荧光蛋白对酸性环境敏感,当环境当环境 pH<5时Sens-GFP 荧光发淬灭,只能检测到红色荧光点状聚集。

图2. 自噬载体图谱
宇玫博(Umibio)自噬慢病毒是一种经专门优化设计,用来监控细胞自噬流的慢病毒工具产品。其融合蛋白元件包含红色荧光蛋白Stub-RFP、绿色荧光蛋白Sens-GFP和自噬标记蛋白LC3,可监控自噬体及自噬溶酶体的形成。其中Sens-GFP是酸敏感型蛋白,而Stub-RFP则是稳定的荧光蛋白,不受外界影响。
本产品具有以下优点:
- Sens-GFP和Stub-RFP均具有高荧光强度;
- Sens-GFP和Stub-RFP具有低细胞毒性;
- 绿色荧光标记Sens-GFP对pH值更为敏感,在自噬溶酶体中淬灭更完全;
- 使用的慢病毒载体感染效率高,可将外源基因有效整合到宿主染色体上,稳定持续表达。
产品应用
使用此产品感染目的细胞72h后,加入诱导剂Rapamycin 诱导24h。

图3.自噬慢病毒感染目的细胞后区分自噬体与自噬溶酶体
产品信息
产品名称:stubRFP-sensGFP-LC3 Lentivirus
产品货号:UR53201
产品规格:200ul/Tube
产品滴度:1 x 108 TU/mL
产品保存:保存于-70℃环境中(若存放于4℃请一周内用完);
若需多次使用,请分装后存放,避免反复冻融。
产品说明书
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