一、启动子活性研究
某些转录因子与其靶启动子中的特异序列结合,从而对基因的表达起YZ或增强的作用,荧光素酶报告基因实验(luciferase report assay)是检测这类转录因子和其靶启动子中的特异顺序结合的重要手段。
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/12734593_%E5%90%AF%E5%8A%A8%E5%AD%90%E6%B4%BB%E6%80%A7%E6%A3%80%E6%B5%8B.jpeg)
二、基因3’UTR区和microRNA结合实验
由于miRNA主要通过作用于靶基因的3’UTR起作用,可以将目的基因3’UTR区域构建至报告基因luciferase的后面, 通过比较过表达或者干扰miRNA后,报告基因表达的改变(监测荧光素酶的活性变化)可以定量反映miRNA对目的基因的YZ作用;结合定点基因突变等方法进一步确定miRNA与靶基因3’UTR的作用位点。
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/12734595_mirna%E9%9D%B6%E5%9F%BA%E5%9B%A0%E9%A2%84%E6%B5%8B.jpeg)
应用案例:
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/8510175_Luciferaseapp001.png)
参考文献:
Downregulation of miRNA-200c links breast cancer stem cells with normal stem cells. Cell. 2009 Aug 7;138(3):592-603. doi: 10.1016/j.cell.2009.07.011. [download]