荧光素酶实验-启动子活性实验、miRNA-3UTR结合实验

荧光素酶实验

一、启动子活性研究

某些转录因子与其靶启动子中的特异序列结合，从而对基因的表达起YZ或增强的作用，荧光素酶报告基因实验（luciferase report assay）是检测这类转录因子和其靶启动子中的特异顺序结合的重要手段。

二、基因3’UTR区和microRNA结合实验

由于miRNA主要通过作用于靶基因的3’UTR起作用，可以将目的基因3’UTR区域构建至报告基因luciferase的后面， 通过比较过表达或者干扰miRNA后，报告基因表达的改变（监测荧光素酶的活性变化）可以定量反映miRNA对目的基因的YZ作用；结合定点基因突变等方法进一步确定miRNA与靶基因3’UTR的作用位点。