日本生研 弯曲杆菌诊断血清（25种分型血清）

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8、标记并做好记录，将接种后的平板和液体培养基在适宜的条件下进行培养。
聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(Polymerase Chain Reaction-Denaturing Gradient Gel Electrophoresis，PCR-DGGE)是聚合酶链式反应和变性梯度凝胶电泳相结合的方法，Z初是Lerman 等于20世纪80年代初期发明的，起初主要用来检测DN登革热段中的点突变。Muyzer等在1993年首次将其应用于微生物群落结构研究。目前，该技术被广泛用于微生物分子生态学研究的各个领域，目前已经发展成为研究微生物群落结构的主要分子生物学方法之一。
PCR-DGGE能够将具有相同长度但有单个碱基差异的DNA分子分离开。分离以DNA在溶液中的解链特性，当温度或变性剂浓度ZG时，DNA分子在不同的区域相对应的解链温度为基础。解链区域的长度从25个碱基对到数百个碱基对不等，与每一个解链区域相对应的解链温度称为解链温度(Tm)。由于一个DNA链上相邻碱基间的堆积作用在DNA双螺旋的稳定上起着相当重要的作用，因此解链区域的Tm值主要取决于核苷酸的序列。既使是很小的变化也会引起DN登革热段Tm值的改变，如单碱基替代可引起1.5 ℃的差异。在DGGE系统中，DN登革热段在变性剂梯度聚丙烯酰胺凝胶中电泳，凝胶中自上而下所含变性剂浓度呈线性增加。DN登革热段在进入变性剂某一浓度时，此浓度下DN登革热段在温度解链区域解链(相当于该区域的Tm值)，此时DNA分子成分枝状结构，它使DNA分子在胶中的移动减慢。如果梯度条件选择恰当，因单个碱基变化使不同的DN登革热段在凝胶中的不同位置分叉，随后DN登革热段移动减慢，从而使不同DN登革热段被分离开来。
PCR-DGGE中常用的变性剂是尿素和甲酰胺。