肠道病 手足口病毒胶体金检测卡

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肠道病 手足口病毒胶体金检测卡

广州健仑生物科技有限公司

手足口病是由肠道病毒引起的传染病，引发手足口病的肠道病毒有20多种（型），其中以柯萨奇病毒A16型（Cox A16）和肠道病毒71型（EV 71）Z为常见。多发生于5岁以下儿童，表现口痛、厌食、低热、手、足、口腔等部位出现小疱疹或小溃疡，多数患儿一周左右自愈，少数患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。

普通病例表现

急性起病，发热、口痛、厌食、口腔黏膜出现散在疱疹或溃疡，位于舌、颊黏膜及硬额等处为多，也可波及软腭，牙龈、扁桃体和咽部。手、足、臀部、臂部、腿部出现斑丘疹，后转为疱疹，疱疹周围可有炎性红晕，疱内液体较少。手足部较多，掌背面均有。皮疹数少则几个多则几十个。消退后不留痕迹，无色素沉着。部分病例仅表现为皮疹或疱疹性咽峡炎。多在一周内痊愈，预后良好。部分病例皮疹表现不典型，如单一部位或仅表现为斑丘疹。

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二、实验方法

1、标本制备

（1）涂片标本方法：先将载玻片通过火焰3次，冷却后，以接种环（或铂金耳）挑选被检材料均匀涂布成直径约1cm的圆形涂片。如材料太浓，则应预先加适量灭菌生理盐水于另一玻片上，用接种环挑取

材料与其混合稀释，待均匀后涂片，也可将生理盐水加入被检材料中，混合均匀后涂片。涂好后，自然晾干。

（2）压印标本方法：用无菌剪子将待检组织标本剪开，用无菌清洁棉球或滤纸将切面的血液吸干，然后以载玻片轻压切面，使之沾上1-2层细胞，然后再在玻片另一处以切面涂拭，得一较厚抹片，将标

本自然晾干。

2、标本固定：被检标本的固定是免疫荧光技术中的重要环节，往往对荧光染色效果有明显的影响。除了研究细胞表面抗原可不固定外，一般均应先固定，然后再进行荧光抗体染色。细菌免疫荧光常用的

固定剂有丙酮、10%甲醛或甲醇，固定条件为室温3-10min或4°C 30-60min。

3、将固定好的玻片标本置于湿盒中，吸取经适当稀释的免疫血清加于标本上，于37°C作用30min。

4、取出载玻片，先以PBS冲去未结合的标记抗体液，然后置大量PBS中漂洗15min，或使用去离子水或蒸馏水缓缓冲洗玻片多次后甩干，然后浸泡于PBS中1min。

5、取出载玻片，用吸水低吸干余留的液体。

6、滴加相应的抗球蛋白荧光抗体，将玻片置于带盖的不透光容器内（底部垫以滤纸，纸上放玻片架，加适量水使滤纸浸湿，玻片数量少时可用平皿，内置2-3个浸湿的棉球），密盖，放置于37°C染色

30min（温度和时间根据标本情况而定）。

7、取出玻片，置玻片架上，先以PBS冲去未结合的标记抗体液，然后置大量PBS中漂洗15min，或直接在中性或偏碱性的自来水下冲洗5min，然后浸泡于PBS中1min。

8、取出玻片，用滤纸吸去多余水分，保持标本湿润，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖封片后置荧光显微镜检查。