上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过STR鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。
产品名称:BEL/FU人肝癌氟尿嘧啶耐药株 含STR鉴定
规格:70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
特点:细胞代数为4代以内,细胞耐药倍数8倍以上;
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后12天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员,我们将尽快为您解决!
注:耐药细胞培养操作流程和普通细胞培养方法基本一致,只是在培养中会加药维持筛选压力
- BEL/FU人肝癌氟尿嘧啶耐药株 含STR鉴定
- 三、细胞生长条件:
细胞系特征 |
细胞株名称:BEL/FU细胞 种属:智人 组织来源:人胃癌 生长特性:悬浮生长 微生物及支原体检测:阴性 安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。 |
培养条件: | 完全培养基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+0.1ug/ml FU GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。 培养条件:37.0C carbon dioxide(CO2),5% |
传代方法: | 收到细胞后,在倒置镜下(Z好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。 (一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,低速离心,打开细胞培养瓶,吸出培养液(注意不要吸出细胞),换 10ml新鲜培养液后继续培养。 (二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下: 1. 低速离心,弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。 2. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中(补加完全培养基至8到10ml)。如果没有特别说明,收到细胞后的次传代一般是一传二。 注:1、观察细胞Z好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。 2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。 3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。 4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。 |
冻存方法: | 冻存液:90%胎牛血清,10%DMSO 储存:液氮储存 |
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做细胞实验的同学看过来。
选择上海琛艺生物细胞有3个理由:
1、细胞状态好,形态佳,易成活,是市面上比较好养的细胞之一;
2、物流迅速,复苏好后发货,次日就能到;
3、使用我司推荐的进口品Pai血清进行培养实验,效果更佳。
专业技术人员万工收藏的细胞培养小技巧:
1. 买细胞要去靠谱的地方买,比如 ATCC 或者素冉生物。一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
2. 不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第二天蕞好更换一次培养基。
3. 发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。
4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快,比如说 MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢,比如 BT474,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。
5. 对于娇弱的细胞,就得细心呵护。胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住,是每天。
细胞培养常见问题及解决方法
问题 | 原因 | 解决方案 |
细胞生长缓慢 | 生长培养基使用不当 | 按照生产商的建议,使用相应的预热生长培养基。 |
生长培养基中血清质量差 | 使用其他批次血清。 |
传代操作不当 | 按照生产商的建议消化时间及传代比例进行操作。 |
换液过于频繁 | 降低换液频率,参考生产商推荐的换液频率。 |
细胞传代次数过多 | 使用传代次数较少的健康细胞。 |
细胞生长超过汇合状态 | 哺乳动物细胞传代应在细胞处于对数期、未达到汇合状态时进行,建议细胞密度达 80-90%传代。 |
细胞被支原体污染 | 将细胞、培养基和试剂丢弃;新取一只冻存细胞,并且使用新的培养基和试剂。 |
细胞复苏存活率低 | 细胞冻存不当 | 新取一只冻存细胞,并储存在液氮中。将细胞储存在液氮中,直至复苏。 |
自行制备的冻存细胞无活性 | 将细胞按照生产商推荐的密度冻存。 |
制备冻存细胞时使用传代次数少的细胞。 |
严格按照生产商推荐的操作程序冻存细胞。请注意本手册推荐的冷冻程序是冻存细胞的一般流程,只能作为指导原则使用。 |
新取一只冻存细胞。 |
细胞复苏方法不当 | 严格按照生产商推荐的操作程序复苏细胞。请注意本手册推荐的解冻程序是复苏细胞的一般流程,只能作为指导原则使用。 |
确保冷冻细胞解冻迅速,接种前用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。 |
复苏培养基使用不当 | 使用生产商推荐的培养基。确保培养基使用前已经预热。 |
细胞稀释过度 | 按照生产商的建议,将解冻后的细胞高密度接种,以改善复苏效果。 |
处理细胞时动作不够轻柔 | 冻存和复苏过程对大多数细胞都会造成不利影 响。不要通过涡旋振荡或者用力敲打培养瓶的方法使细胞脱落(培养昆虫细胞时除外),也不要高速离心细胞。 |
冻存液中所用保护剂在储存过程中未避光 | 如果未避光储存,冻存保护剂会转变为对细胞有毒性的物质;新取一只冻存保护剂,重新冻存细胞。 |
★由于细胞库现有细胞类目多,为了不出现混乱错误,需要了解相关细胞价格及详细资料直接call,对您造成的不便还请见谅!
★注:如运输过程中导致细胞污染或者死亡,我们将无条件补发
收货后十个工作日内有其他问题提供照片可半价重发
,通过低温保藏储备一些细胞,以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象,或常规检测呈阳性结果,那么Z可靠的补救措施是扔掉所有培养物,清洁培养箱和超净台,一切从头开始。当然,你得确保储备的细胞是不含支原体的。
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