出入境检测 新布尼亚病毒IGG/IGM抗体联检测试纸条

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新布尼亚病毒IGG/IGM抗体联检测试纸条（胶体金法）

广州健仑生物科技有限公司

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五、口腔微生物

1、24h内不刷牙，早饭后2h取样（或根据研究选择特定时间段）；

2、取样前漱口，然后用无菌金属环刮取牙齿表面10次；

3、将金属环放入装有1ml盐溶液的1.5ml无菌离心管，盐溶液经过UV照射以避免DNA污染；

4、将样品置于冰上，运至实验室，-80℃保存；

5、样品用无菌蒸馏水悬浮，10,000×离心10min。

1、24h内不刷牙，早饭后2h取样（或根据研究选择特定时间段），使用特定唾液取样器；

2、待取样人向取样器中吐2-3次唾液（一次约1ml）；

3、将DNA稳定剂加到唾液中；

4、密封后，做好样品标记；

5、-80℃保存。

口腔微生物DNA提取方法：推荐试剂盒：QIAamp DNA Mini Kit

六、皮肤微生物

1、取样前24h不能洗澡，不能使用润肤乳及KJ活性的肥皂等；取样前7d不能使用KJ成分的沐浴用品；

2、取样区域为4cm2，采用棉签（ Catch-All? Sample Collection Swabs）或无菌手术刀片轻轻刮取皮肤表面取样；

3、指甲样品剪碎后用蛋白酶K过夜55℃处理，其他样品用yeast lysis buffer and lysozyme处理1h（37℃）；

4、样本珍贵，需进行多管备份保存。-80℃保存。

皮肤微生物DNA提取方法：推荐试剂盒：Invitrogen PureLink Genomic DNA Kit

七、血液微生物

1、用EDTA抗凝管抽取1-2ml全血；

2、颠倒抗凝管 8-10 次，充分混匀EDTA 和全血，保证抗凝效果；

3、-20℃保存。

血液微生物DNA提取方法：推荐试剂盒：QIAamp DNA Blood Mini kit

八、植物内生菌微生物

1、根据研究选取新鲜植物组织；

2、依次用70%无水乙醇和2.5%次氯酸钠，浸泡40s和10min，每100ml 2.5%次氯酸钠加一滴吐温80；

3、无菌水清洗2-3次；

4、进行核酸提取实验或放置-80℃保存。

植物内生菌微生物DNA提取方法：

内生细菌样本DNA提取参考文献：

内生真菌样本DNA提取参考文献：

九、空气微生物

雾霾（所有工具每天更换，用75%酒精洗涤）

1、抽取针对实验目的空气微颗粒，用不同孔径大小的无菌滤膜筛选目的颗粒；

（将含颗粒过滤膜装入无菌铝箔内，密封在-80℃长期保存）

2、截取适量大小过滤膜，置于含1×PBS缓冲液的50ml离心管；

3、在 4℃条件下，用200g加速度离心2h；

4、温和漩涡处理，0.2μm的Supor 200 PES Membrane Disc Filter 过滤纸过滤重悬液。

参考文献：Optimized DNA extraction and metagenomic sequencing of airborne microbial communities

空气微生物DNA提取方法

推荐试剂盒：

MoBio PowerSoil DNA isolation kit

十、水体微生物

1、水体的取样深度和范围，可以根据研究目的进行确定；

2、采样后进行滤膜过滤，选择合适孔径的滤膜，对于澄清水体或者略浑浊水体，选用0.22μm或者0.45μm的滤膜，取样体积大于5L；对于浑浊水体，建议先用大孔径的滤膜过滤一遍，再用小孔径的滤膜过滤。水体泥样的采集提供大于5g样本。

3、取过滤后的滤膜或者洗脱滤膜的缓冲液进行核酸提取实验。

水体微生物DNA提取方法

手工提取参考文献：