实时荧光定量PCR技术
反硝化作用是造成土壤氮素损失的主耍途径之一,不仅导致氮肥利用率降低, 同时增加温室气体N2O的排放量,破坏大气臭氧层,加速气候变暖,对环境产 生严重影响。亚硝酸还原酶基因(nirK、nirS)是反硝化过程中的关键功能基因,在反硝化过程中起着重要作用,而稻田反硝化过程所产生的N2O是重要的温室气体,要深入探讨水稻土反硝化基因与N2O排放的关系,需要明确反硝化基因的丰度和表达特征,以及分离和鉴定上壤中的优势反硝化功能菌, 才能为进一步开展节氮减排打下坚实的基础。
由于土壤细菌体内的反硝化功能基因不一定都表达,可提取和纯化细菌的 RNA,通过反转录将RNA转化成cDNA,利用实时荧光定量PCR技术来研究土壤屮能表达的反硝化基因的微生物种类和数量。探讨反硝化基因的表达与长期施肥的内在联系及与N2O释放的耦合机制。
客户需知:
1、请您提供新鲜的且尽量多的材料,或直接提供纯化好的总RNA或DNA(大于5ug/样本)。
2、详细背景资料:DNA/RNA来源,丰度。
结果提供:
1、实验详细步骤,和相关数据。
2、标准曲线,扩增曲线,溶解曲线。
3、完整的实验报告(含软件分析结果)。