| 产品介绍 | 简介
目前酶免疫分析（EIA)技术，已被广泛应用于抗原，半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶（HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶，3,3’5,5’-四甲基联苯胺二盐酸(3,3´,5,5´tetramethylbenzidine,TMB)为过氧化物酶底物，常用作ELISA等免疫检测的显色剂。TMB被过氧化氢氧化时（由HRP催化）可形成蓝色产物，主要吸收峰在370nm和652nm。加入硫酸等酸性终止液后，变成黄色，吸收峰为450nm。TMB灵敏度很高，达到相同的检测灵敏度需要的量比ABTS少，但这也可能产生较高的背景，所以要求使用较少的蛋白或较低的抗体浓度。
单组分超灵敏TMB显色液无需混合，方便快捷，减少误差，灵敏度高。
试剂盒内容：
产品编号 C04-03001-50 C04-03001-100
TMB显色液A 50ml 100ml
TMB终止液B 50ml 100ml
说明书 一份
保存方法： 2-8 ºC避光保存，一年有效。
显色步骤
1、加液：待样品孔中加完HRP结合物并孵育一定时间后，用适当洗涤液洗板3-5次，每孔加底物显色液A 100ul，根据个人实验需要，在室温（15-25℃）或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间，直至显色至预期深浅。
2、终止：每孔加入100ul终止液B终止反应，孔中反应液由蓝色变为黄色。
3、终止反应后15分钟内在450nm处测定各孔溶液的吸光值。
4、对照：空白对照不加HRP标记的抗体/抗原和阴性对照结果应无色。阳性对照及加HRP标记的抗体/抗原产生深蓝色产物。
5、注意：如果出现高的反应背景或沉淀，表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀，可在终止后马上读数；或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。
安全性：
1、实验用品应该专一，避免交叉污染。
2、TMB对人体有刺激性，请注意适当防护。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
