荧光免疫层析法 热带病西尼罗河抗原检测试剂

热带病西尼罗河抗原检测试剂

广州健仑生物科技有限公司

1.实验室检查

白细胞数减少，脑炎型者脑脊液中淋巴细胞增多，蛋白ZG。

2.免疫学检查

利用血清学抗体检测方法，常用ELISA（酶联免疫吸附实验）法，采用患者急性期和恢复期双份血清，两份血清同时进行检测，以恢复期血清较急性期特异性IgG抗体滴度升高4倍以上为阳性，有助于本病的诊断。

3.病原学检查

自潜伏末期至发病后第5天，从患者血液或脑脊液中分离出病毒，阳性率较高，对新分离病毒的鉴定一般采用已知血清进行中和实验。

4.分子生物学检查

RT-PCR（逆转录-聚合酶链反应）法检测，通过设计西尼罗河热病毒特异引物对血清或脑脊液标本进行RT-PCR试验，阳性率高，具有特异性诊断价值。

用途

西尼罗(WN)病毒IgG ELISA，利用了西尼罗重组抗原检测人体血清或血浆中的西尼罗抗体。本实验仅用于辅助诊断人感染了西尼罗病毒，不用于筛查血液或血液成分。仅供专业人员体外诊断使用。

概述

 感染了西尼罗病毒会导致包括脑炎等一系列症状的疾病，西尼罗病毒在世界广泛传播，已在50多个国家检测出该病毒。本试验经CDC提供的试剂检验与验证。本试验使用了一种称为WNRA的重组抗原，它可以作为西尼罗病毒感染的快速血清学指标，WNRA蛋白是一种重组抗原，它是由含有西尼罗病毒两个抗原的序列多肽构成。

实验的原理

检测西尼罗病毒IgG ELISA 是基于两步夹心法原理制造的。

提供的材料

• 微孔板（96孔 12x8）：即用  每孔均包被结合西尼罗重组抗原的单抗。2－8℃下保存至保质期。

注意：WNRA和NCA已包被于微孔板。

• IgG样品稀释液：1支 25ml 即用 2-8℃下保存至使用。
• IgG阴性质控：1支 30ul  2-8℃下保存至使用。要长时间储存，将其分装于小瓶里，在-70℃下储存。
• IgG阳性质控：1支 30ul  2-8℃下保存至使用。要长时间储存，将其分装于小瓶里，在-70℃下储存。
• 洗涤液（10X）：1瓶 120ml  2－8℃下保存至使用。
• EnWash：1瓶 20ml 2－8℃下保存至使用。
• 酶联物：一瓶6ml 即用 2－8℃下保存至使用。
• TMB底物液： 1支 9ml 即用  2－8℃下保存至使用。
• 终止液；1支6ml 即用  2－8℃下保存至使用。

试剂应避免反复冻融。

西尼罗河病毒荧光玻片法检测试剂盒

西尼罗河病毒荧光玻片法检测试剂盒

西尼罗河间接免疫荧光法检测试剂盒

西尼罗河间接免疫荧光法检测试剂盒

热带病西尼罗河抗原检测试剂

操作步骤：

• 标记将要使用的板条，注意微孔板已经按照统一排列，如下所述包被西尼罗抗原和质控抗原。

• 将血清样品﹑阴性质控和阳性质控同样地用样每孔加入50ul稀释后的样品，以下为一个血清样品使用一个板条的典范。
• 品稀释液按1：300稀释。

• 封板，在湿润的温育器里37℃下温育1小时。
• 温育后，用自动洗板机，使用洗涤液洗板6次。
• 在每孔中加入50ul的酶联物。
• 封板，在湿润的温育器里37℃下温育1小时。
• 温育后，用自动洗板机，使用洗涤液洗板6次。
• 每孔加入150ul的EnWash，在室温下温育5分钟
• 温育后，用自动洗板机，使用洗涤液洗板6次。
• 每孔加入75ul的TMB底物液。
• 封板，在室温下，避光处温育10分钟。
• 每孔加入50ul的终止液终止反应。
• 在450nm处读取吸光率。

结果的计算

结果的变化将会非常大，以下结果仅供指引。

计算ISR值：

计算在同一实验里WNR抗原的两个阴性质控的平均值，计算同一实验里NC抗原的两个阴性质控的平均值，用WNRA/NCA，得出阴性质控的ISR值。同样地计算阳性质控和样品得ISR值，阳性质控的ISR值应高于3.0，阴性质控的ISR值应低于1.5。

结果的判断：

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肺炎链球菌6、14、19及23型，常引起儿童  肺炎链球菌性疾病。40%～70%的正常人上呼吸道中携带有  毒力的肺炎链球菌。由此可见呼吸道粘膜对肺炎链球菌存  在很强的自然抵抗力。当出现某种降低这种抵抗功能的因  素时，肺炎链球菌可引起感染，如①呼吸道功能异常：病  毒及其它感染性因子损伤呼吸道粘膜上皮细胞；某些异常  因素（如过敏）导致粘液的过度分泌，使侵入的病原菌受  到保护；各种原因导致的支气管阻塞及各种原因导致的纤  毛功能损伤；②酒精及药物中毒：酒精及某些药物中毒可  YZ吞噬细胞的活性及咳嗽反射，有利于病原菌的吸入；  ③循环系统功能异常及任何原因导致的肺充血、心功能衰  竭；④其它：营养缺陷、体质虚弱、贫血、血清补体水平  低下等。肺炎链球菌肺炎常突然发病，表现为高热、寒战  、胸膜剧烈疼痛、咳铁锈色痰。10%～20%的患者可于高热  期伴发菌血症。其病理表现主要是Z初肺泡内有大量纤维  蛋白渗出液，继之是红细胞和白细胞向肺泡内渗出，Z终  导致病变部位肺组织实变。病变通常仅累及单个肺叶，故  称为大叶性肺炎。如果早期使用抗生素ZL，可阻止肺实  变发生。