腺病毒转化的人胚肾细胞;AAV-293价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入完全培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入完全培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 腺病毒转化的人胚肾细胞;AAV-293价格
形态特性 上皮细胞
品Pai 贴壁生长
特征特性 我们推荐使用AAV-293细胞株繁殖腺病毒相关重组病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293细胞株,但产生的病毒滴度更高。 HEK293细胞是剪切过的腺病毒5型DNA转染的人胚肾细胞。 跟HEK293细胞一样,AAV-293细胞反式表达腺病毒E1基因,当共转染三个AAV助质粒(一个含ITR的质粒,pAAV-RC, 和E1缺失助质粒)时,可以产生有感染力的腺病毒-相关病毒颗粒。
培养条件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:
2。3天内可长满。
传代情况 P(10+5)
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:7,11,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:15,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19
同工酶
染色体
使用权限 A类
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml完全培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入完全培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
LH (Rabbit luteotropic hormone) ELISA Kit 兔子促黄体激素Multi-class antibodies规格: 96T
Anti-Cyclin C/FITC 荧光素标记周期素C抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DAPK3/ZIP Kinase 凋亡相关蛋白激酶3抗体 规格 0.1ml
Chicken IgM/PE 荧光素PE标记鸡IgM 0.1ml
CD85c 英文名称: 白细胞免疫球蛋白样受体8抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh ZSWIM2 E3泛素蛋白连接酶ZSWIM2抗体 规格 0.2ml
Anti-Cyclin C/FITC 荧光素标记周期素C抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
VCAM-1/CD106 (Rabbit Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit 兔血管内皮细胞粘附分子1Multi-class antibodies规格: 96T
Anti-CYP1A1/FITC 荧光素标记细胞色素P450 1A1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DAB2IP Dab2相互作用蛋白抗体 规格 0.2ml
Rat IgG/Cy7 荧光素Cy7标记大鼠IgG(细胞流式同型对照) 0.1ml
Lactoperoxidase 英文名称: 唾液过氧化物酶LPO抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh ZNF474/ZFP106 锌指蛋白474抗体 规格 0.1ml
Anti-CYP1A1/FITC 荧光素标记细胞色素P450 1A1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠25羟基维生素D3(25 HVD3)ELISA试剂盒,英文名:25 HVD3 ELISA Kit大鼠5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒,英文名:5-HIAA ELISA Kit豚鼠白介素4(IL4)ELISA试剂盒,英文名:IL4 ELISA Kit人AP-2复合物亚基β(AP2B1)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠孕酮(PROG)ELISA试剂盒,英文名:PROG ELISA KiISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 9小鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒,英文名:SHBG ELISA Kit人ALK酪氨酸激酶受体ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISA试剂盒,英文名:CyPA ELISA KiISA Kit for Human Amphiregulin小鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒,英文名:EG-VEGF ELISA Kit
ELISA Kit for Human Epithelial discoidin domain-containing receptor 1小鼠组织金属蛋白酶YZ因子2(TIMP2)ELISA试剂盒,英文名:TIMP2 ELISA Kit胆固醇(Cholesterol)ELISA试剂盒通用96T0.156-10 nmol/mL小鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA试剂盒,英文名:MIP-3α/CCL20 ELISA KiISA Kit for Human Catechol O-methyltransferase小鼠骨桥素(OPN)ELISA试剂盒,英文名:OPN ELISA Kit人CD19分子(CD19)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒,英文名:ER ELISA KiISA Kit for Human C-C motif chemokine 25小鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA试剂盒,英文名:GABA ELISA Kit人Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL小鼠Ca-ATP酶(Ca-ATPase)ELISA试剂盒,英文名:Ca-ATPase ELISA KiISA Kit for Human C-X-C motif chemokine 2小鼠白细胞介素5(IL-5)ELISA试剂盒,英文名:IL-5 ELISA Kit
酸性磷酸酶的阻断剂 10ml Sigma原料
VMAT2 英文名称: 脑单胺类神经递质转运蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CAMK2G (Ter286) 磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶CAMK2G抗体 规格 0.1ml
LH(Luteinizing Hormone) 人促黄体生成素(多肽)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
DSCC1 英文名称: DSCC1蛋白抗体 0.2ml
Anti-Aggrecan2/ADAMTS-5 软骨蛋白聚糖抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-HBV/pre S1/S2 protein /FITC 荧光素标记抗乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-PDGF-A/FITC 荧光素标记血小板源性生长因子-A抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh BAT3/BAG6 Bcl2相关抗凋亡基因6抗体 规格 0.2ml
5-HTR2A 5-羟色胺受体2A抗原 0.5mg
GSK-3 beta (NT) 英文名称: 糖原合酶激酶-3β抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗大鼠IgG 规格 0.1ml
Anti-PDGF-A/FITC 荧光素标记血小板源性生长因子-A抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml