4%多聚甲醛含DEPC Paraformaldehyde with DEPC

HB180122

4% Paraformaldehyde (with DEPC)

4%多聚甲醛（含DEPC）

产品信息

产品描述

多聚甲醛（Paraformaldehyde），又称聚缩醛，为甲醛（Formaldehyde）的聚合物。是一种杀菌剂、抗真菌剂。免疫实验中常作为一种固定剂用于细胞或组织样品的固定。在该应用中，发挥固定作用的是单体甲醛，因此，使用前需将多聚甲醛经过加热使之转化为单体甲醛。

本品为4%的多聚甲醛溶液，是一种蛋白交联剂，对组织穿透性好，组织收缩小。且溶液较温和，能很好保存组织的抗原性和细微结构，适用于组织标本和细胞涂片的固定，主要用于免疫细胞化学（ICC）、免疫组织化学（IHC）、免疫电镜等实验。另外，本品使用经DEPC处理的溶液体系（RNase-free）配置的4%多聚甲醛溶液，除了可以做免疫组化实验外，还可以用于原位杂交实验。

运输和保存方法

冰袋运输。4℃避光保存。有效期1年。

使用说明

1.免疫组化

1）组织固定：室温或4℃浸泡固定2-24 h，用缓冲液漂洗后即可树脂包埋用于组织切片。

注：依据切片的厚度来决定固定时间，不要超过24 h。

2）切片固定：室温或4℃固定10 min-2 h，视切片厚度而定，用缓冲液漂洗后即可用于染色。

3）细胞固定：室温或4℃固定10-30 min，用缓冲液漂洗后即可用于染色。

2.原位杂交

注意：实验过程要保证操作不受环境RNase影响，可用我司的RNase remover（固相RNse酶清除剂，货号：10609ES60）喷洒工作台，杂交炉等准备洁净环境；实验操作中使用RNase-free的枪头，离心管，盖玻片，以及RNase-free的PBS或者SSC清洗液。

1）组织固定：4℃浸泡固定2-24 h（边摇晃），用RNase-free缓冲液（如DEPC-treated PBS）漂洗后即可用石蜡包埋用于组织切片；或者固定好的组织浸泡在30%蔗糖（溶于RNase-free PBS）4℃过夜，摇晃，使其沉浸在液面之下，即可用OCT包埋剂包埋用于组织切片；

2）切片固定：

A、用预冷的4%PFA于室温固定10 min-20 min，视切片厚度而定；

B、用RNase-free缓冲液（如DEPC-treated PBS）漂洗3次，每次5 min；

C、用蛋白酶K（1 μg/mL in 50 mM Tris pH 8, 5 mM EDTA）低速摇晃，室温处理5-45 min；

D、用预冷的4%PFA于室温固定5-10 min，视切片厚度而定，用RNase-free缓冲液（如DEPC-treated PBS）漂洗3次，每次5min；

E、在磁力搅拌器上准备一水盘，加入300 mL DEPC处理水和3.5 mL三乙醇胺（缓慢加入）；

F、将固定后的切片放入上述水盘中，并在切片上方滴750 μL无水醋酸，边搅拌边孵育10 min。

G、用DEPC处理的PBS清洗3次，5 min/次；之后进入后续的杂交实验。

注意事项

1）甲醛溶液有毒，请注意防护。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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