上海细胞划痕实验外包.
细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法,可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。
上海细胞划痕实验外包.实验内容:
材料:6孔板(其他的也可以,但感觉6孔比较好,大小适中),MARKER笔,直尺,20微升枪头(灭菌),无血清培养基,PBS
步骤:能灭菌的器械都要灭菌。MARKER笔,直尺在操作前紫外照射30MIN(超净台内)
1.先用MARKER笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5-1cm一道,横穿过孔,每孔至少穿过5条线。
2. 在空中加入约5*105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过液能铺满
3. 第二天用枪头比着直尺,尽量垂直于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜
4. 用PBS洗细胞3次,去除划下的细胞,加入无血清培养基。
5.放入37度5%CO2培养箱,培养,按0. 6 .12 24小时取样,拍照。
注意事项:
一般做划痕实验,一般都在无血清或者低血清状态下培养的,否则细胞增殖就不能忽略
按照6孔板背后划线的垂直方向划痕,可以形成若干交叉点,作为固定的监测点,这就解决了前后观察时位置不固定的问题。