PCR Enhancer PCR 增强剂
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格（元） |
PCR Enhancer PCR 增强剂 | 10117ES03 | 1 mL | -20 ºC保存 | 102.00 |
产品描述
PCR Enhancer是一种由多种成分组成的混合添加剂，在PCR反应中，PCR Enhancer能够有效降低高GC模板和具有复杂二级结构模板的解链温度，极大地减少DNA二级结构对PCR的影响，增加PCR反应的灵敏度和特异性，且兼容几乎所有DNA聚合酶的扩增体系。当优化PCR程序无法有效扩增目的片段时，加入PCR Enhancer往往能得到意想不到的结果。本产品可能会降低PCR的保真度。因此，在进行高保真PCR时慎用。
质量控制
核酸外切酶残留检测：10 μL本品和1 μg λDNA -HindIII，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。
核酸内切酶残留检测：10 μL本品和1 μg λDNA，37℃温育4 h，DNA的电泳谱带无变化。
使用方法
本产品为5×浓度，推荐终浓度为1×。如50 μL反应体系中，加入PCR Enhancer 10 μL。
运输与保存方法
冰袋运输。-20 ºC保存。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
应用实例
以人基因组为模板，使用Taq DNA Polymerase扩增GC含量为72%的片段。
PCR反应体系（冰上配制）
组分 | 体积 | 终浓度 |
ddH2O | to 50 μL | - |
10×PCR Buffer(with 15 mM MgCl2) | 5 μL | 1× |
dNTP Mix (10 mM each) | 1 μL | 0.2 μM |
DNA模板 | 100 ng | 2 ng/μL |
Primer正向 (10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
Primer反向 (10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
Taq DNA Polymerase(5 U/μL) | 0.4 μL | 2 U/50 μL |
PCR扩增程序
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
变性 | 95℃ | 30 sec | 30 |
退火 | 55℃ | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 60 sec/kb | |
终延伸 | 72℃ | 7 min | 1 |
琼脂糖凝胶电泳检测：
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